UNIVERSIDADNACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS (Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA) FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS EAP. GENÉTICA Y BIOTECNOLOGÍA TEMA: COMPROBACIÓN DE LAS LEYES DE MENDEL CURSO : GENÉTICA GENERAL PROFESOR : INTEGRANTES : Dr. MISAEL GUEVARA BALBIN BERRIO VICTOR 13100135 HUAMAN CHUNGA ROSA MIRELLY 13100029 CICLO : 2015-0 ANTONIO Ciudad Universitaria, marzo 2015 I. INTRODUCCIÓN La Drosophila sp es un insecto díptero del género de moscas pequeñas de la familia Drosophilidae, es fácil de observar, con frecuencia se encuentra cerca de donde haya frutas dulces maduras por ello, también se le conoce como mosca de las frutas su uso en el laboratorio de Genética empieza en 1906, cuando W.E. Castle y Woodworth (genetista temprano) de la Universidad de Harvard, se dan cuenta de que se pueden cultivar con facilidad, las hembras pueden poner 800 huevos por día y tienen un ciclo reproductivo sumamente rápido de 15 días y una por demás cómoda multiplicación en el laboratorio. Morgan inspirado por el trabajo de Castle la utiliza en sus estudios acerca de la teoría cromosómica de la herencia, y desde ese momento ha sido utilizada ampliamente en los laboratorios de Genética de todo el mundo. Incluso ha sido usada por la NASA en pruebas en el espacio extraterrestre. Su genoma fue secuenciado en el año 2000 a pesar de que quedan misterios por desvelar, no sería descabellado pensar que la primera construcción artificial de un animal 'complejo' fuera similar a esta mosca. Actualmente se ven relacionados con los estudios acerca del cáncer, las enfermedades neurodegenerativas o la drogadicción. Pero en la naturaleza hay millones de especies de animales y elegir una como modelo parece tarea difícil. Thomas Hunt Morgan enfatizó sus estudios genéticos, estudiando a la mosca de la fruta Drosophila melanogaster, y lo consideró como un perfecto modelo biológico por su características ya mencionadas, además de presentar dimorfismo sexual manifestante (Genética, 2008). Morgan se interesó por el problema de la herencia, para entonces las teorías de Mendel acaban de ser redescubiertas para 1900 y Morgan ya con previos estudios en el desarrollo embrionario de Drosophila le intereso estudiar la aplicación de estas leyes en los animales. Así comprobó las 3 leyes mendelianas: La ley de la uniformidad planteada por Mendel que establece que si se cruzan dos razas puras para un determinado carácter, los descendientes de la primera generación son todos iguales entre sí e iguales a uno de los progenitores. La Ley de segregación que establece que los caracteres recesivos, al cruzar 2 razas puras, quedan ocultos en la primera generación, reaparecen en la segunda en proporción de uno a tres respecto a los caracteres dominantes. Los individuos de la segunda generación que resultan de los híbridos de la primera generación son diferentes fenotípicamente unos de otros por lo que para corroborar su genotipo se realiza un cruce de prueba y , además , la ley de la independencia de caracteres que establece que los caracteres son independientes y se combinan al azar cada par de alelos que controla un carácter se transmite de manera independiente de cualquier otro par de alelos que controlen otro carácter en la segunda generación, combinándose de todos los modos posibles. (Valega). Estas 3 fueron explicadas por el padre de la genética experimental moderna, el biólogo estadounidense Thomas Hunt Morgan. Sin embargo su aportación más importante fue que con base en estas cruzas pudo dar pruebas irrefutables del ligamiento entre los genes. Morgan continuo con estos estudios y encontró más mutantes de genes no solamente ligados al cromosoma X, también genes que estaban presentes en otros cromosomas, lo que le ayudo a establecer una correcta metodología experimental en las cruzas de Drosophila melanogaste, así como formular la revolucionaria teoría de la herencia cromosómica y la correcta segregación de los cromosomas, en total Morgan y su equipo encontraron cerca de 61 mutaciones en Drosophila melanogaster. Morgan presento estos estudios de la misma manera en que Mendel lo hiciera mucho antes con ayuda del análisis estadístico. Si bien a Mendel, el uso de la estadística le valió el archivamiento de su trabajo, además de ser rechazado por la comunidad científica, en el redescubrimiento de su trabajo este factor fue determinante para fundar las leyes de la genética. Con esto la introducción del análisis estadístico se dio a toda investigación biológica a lo largo del tiempo, y dio paso a la fundación de la bioestadística como clave para hacer valida alguna investigación. La estadística sirve como una herramienta con el fin de probar hipótesis de trabajo, además ayudar a predecir un evento o para saber si algunos resultados son significativos o no. Entre muchos analisis estadisticos utilizados para la biologia se pueden mencionar: Binomial, Poisson, Distribución normal, ji-cuadrada (X2), T-student, regresion y correlacion lineal, ANOVA, analisis multivariado, KolmogorovSmirnov, Mann-Whitney y todas las pruebas Post-Hoc (prueba de Fisher, Bonferrioni, Tukey, Duncan, etc). adicionamos el azúcar y luego de trozar el agar agar adicionamos a la mezcla. 20 gr de agar agar. para finalmente adicionar ac. Finalmente con ayuda del pabilo amarrar la parte superior de la gaza para sostener algodón dentro de esta. Primero hacer en forma de bola el algodón y con la gaza envolver el algodón. Elaboración de los tampones de los frascos Utilizar un gran pedazo de algodón para la elaboración del tampón. MÉTODOS: . Propiónico.II. una vez disuelta el agar agar agregar la levadura previamente diluida en 200 ml de agua (sacada del volumen inicial).propiónico. 20 gr de levadura y 5 ml de Ac. Por último verter dos dedos de profundidad en los frascos previamente esterilizados con sus respectivos tampones. remover suavemente la mezcla hasta uniformizar. MATERIALES Y MÉTODOS MATERIALES Frascos de vidrio (mostaza o Nescafé) Agar agar (En tiras-Gelatina china) 180g Levadura 100 gr 2 ½ kg de azúcar Gasa Algodón Pabilo Pincel personal Plumón marcador Calculadora Elaboración del medio de cultivo: Para esto necesitamos 100 ml de agua. 30 gr de azúcar. Vertemos el agua en un recipiente hasta el punto de hervor. RESULTADOS 1. ambos de líneas puras.Para el experimento se trabajó con líneas puras de moscas de la especie Drosophila sp (ver anexos Fig 06 y 07) entre silvestres (color de ojos rojos y alas normales) y sus mutaciones respectivas para cada cruza (Ver anexos Fig 03): EN MONOHIBRIDISMO Silvestre (++) x Vestigial (vgvg) (alas no funcionales y de menor tamaño) EN DIHIBRIDISMO: Vestigial .1 MONOHIBRIDISMO Se cruzó un macho mutante (homocigoto recesivo vgvg) para el carácter alas vestigiales (Ver anexos). con un hembra silvestre (++).Silvestre (vgvg ++) x Silvestre –Ebony (++ ebeb) (cuerpo oscuro) LIGADOS AL SEXO Silvestre x White (ojos blancos -ligado al sexo) III. Para la F1 (Filial 1) a partir de los cruces para Monohibridismo y Dihibridismo.1 de resultados esperados para proporciones genotípicas y fenotípicas Hembra Macho + + vg vg +vg +vg +vg +vg Proporciones genotípicas: +vg = Heterocigotos 100% . Tabla 1.1. 1. Tabla 1. la descendencia obtenida fue toda silvestre y cumple con el fenotipo esperado mostrado en la tabla 1.4: Resultados del estadístico Chi.2 de resultados esperados en la proporción para machos y hembras Proporción 1 1 Macho Hembra Porcentaje 50 % 50 % Por datos teóricos se sabe que en una descendencia la probabilidad de que un descendiente sea macho o hembra es de 50% para cada uno. Resultados obtenidos En la tabla 1. Para corroborar si la proporción de individuos machos y hembras cumplen con la proporción 1:1 esperada hacemos uso del estadístico Chi. Tabla 1. Tabla 1.1.1.1.3: Resultados obtenidos Sexo Fenotipo Machos Hembras Total Silvestre 46 54 100 Vestigial - Como se observa.cuadrado.1.cuadrado para la proporción de sexo 1:1 Descende ncia observad a Descende ncia esperada Diferencia (OBS−ESP)2 (OBS−ESP)2 ESP GL X2 .1.1.3 se muestra la descendencia obtenida de esta cruza después de algunos días de incubación y seguimiento.Proporciones fenotípicas: Silvestres 100% Del tablero de Punnett se observa que toda la descendencia esperada sea de fenotipo silvestre. 1 de resultados esperados para proporciones genotípicas y fenotípicas Hembra Macho + eb + eb + eb + eb vg+ +vg +eb +vg +eb +vg +eb +vg +eb vg+ +vg +eb vg+ +vg +eb vg+ +vg +eb +vg +eb +vg +eb +vg +eb +vg +eb +vg +eb +vg +eb +vg +eb +vg +eb +vg +eb Proporciones genotípicas: +vg +eb = Doble heterocigotos 100% . ++ebeb vgvg++ X Tabla 1.64 0.Machos Hembra s Total 46 54 50 50 100 100 16 16 0.46 y 1. 1.32 1 0.30 respectivamente.07 que corresponde a las probabilidades de 0.2 DIHIBRIDISMO Se cruzó una hembra mutante (doble homocigota ++ ebeb) para las características de cuerpo ébony (ebeb) (Ver anexos). con un macho vestigial (doble homocigoto vgvg ++). Esto significa que nuestra probabilidad está dentro del rango aceptable con un valor crítico del 5%.32 0.64 Este valor de Chi-cuadrado se encuentra entre 0.50 y 0. Por tanto podemos decir que nuestros datos obtenidos se ajustan a la probabilidad 1:1 para sexo.2. Tabla 1.2.3: Resultados obtenidos Sexo Fenotipo Machos Hembras TOTAL Silvestre Vestigial Ebony 52 48 100 - - Vestigial ebony - Como se observa. Machos Hembra Descende ncia observad a 52 48 Descende ncia esperada Diferencia 50 50 4 4 (OBS−ESP )2 2 (OBS−ESP ) ESP 0.2 de resultados esperados en la proporción 1:1 para machos y hembras Proporción 1 1 Macho Hembra Porcentaje 50 % 50 % Por datos teóricos se sabe que la proporción de machos y hembras esperada es de 1:1. la descendencia obtenida fue toda silvestre y cumple con el fenotipo esperado mostrado en la tabla 1.08 0.2.cuadrado. para corroborar si la proporción de individuos machos y hembras cumplen con los datos esperados hacemos uso del estadístico Chi.08 G L X2 . Tabla 1.2. Resultados obtenidos En la tabla 1.3 se muestra la descendencia obtenida de este cruce después de algunos días de incubación.4: Resultados del estadístico Chi.2. 50% del total de individuos para machos y hembras.2.2.cuadrado para la proporción 1:1 sexo. Tabla 1.Proporciones fenotípicas: silvestres 100% Del tablero de Punnett se observa que la descendencia esperada para los individuos de la F1 será de fenotipo silvestre. Esto significa que nuestra probabilidad está dentro del límite de probabilidad aceptable con un nivel de significación del 5%. se observa que en la descendencia esperada de individuos en un 75% presentarían fenotipo silvestre (+_) y un 25 % del fenotipo mutante (vgvg) en la proporción 3:1. 2. Tabla 2. Por tanto podemos decir que nuestros datos obtenidos se ajustan a la probabilidad 1:1 para sexo.70 y 0.50 respectivamente. Resultados para la F2 (Filial 2) a partir de cruzas entre hembras y machos obtenidos en la F1 para Monohibridismo y Dihibridismo.1. los que fueron colocados en un frasco para obtener la F2.15 y 0.s Total 1 100 0. 2.1: Resultados esperados para proporciones genotípicas y fenotípicas Hembra Macho + Vg + vg ++ +vg +vg vgvg Proporciones genotípicas: ++= Homocigoto dominante (1/4) +vg= Heterocigoto (2/4) vgvg= Homocigoto recesivo (1/4 ) 25 % 50 % 25 % Proporciones fenotípicas (3:1) Silvestres = 3/4 Vestigial = 1/4 75% 25% Del tablero de Punnet.16 Este valor de Chi-cuadrado se encuentra entre 0.46 que corresponde a las probabilidades de 0. .16 0.1 MONOHIBRIDISMO (F1xF1) A partir de la F1 se separaron 6 hembras y 6 machos ambos silvestres. que también se encuentra dentro del límite de aceptación por lo que nuestros datos obtenidos se ajustan a la proporción de 3:1 para el fenotipo silvestre (+_) y vestigial (vgvg) respectivamente.2 se muestra la descendencia de 100 individuos obtenidos del cruce después de varios días.1.cuadrado para sexo (proporción 1:1) Descende ncia observad a Descende ncia esperada Diferenci a (OBS−ESP)2 2 (OBS−ESP ) ESP GL X2 .cuadrado proporción 3:1 Silvestr e Vestigi al Total Descende ncia observad a 79 Descende ncia esperada Diferenci a 75 16 0. Tabla 2.1.1.3: Resultados del estadístico Chi.1.1.07 que corresponde a las probabilidades de 0.Por datos teóricos se sabe que en una descendencia la probabilidad de obtener machos y hembras está en una proporción 1:1.85 2 (OBS−ESP ) ESP GL X2 1 0.4: Resultados del estadístico Chi.64 100 100 32 0.cuadrado.1 hacemos uso del estadístico Chi.2: Resultados obtenidos Sexo Fenotipo Machos Hembras TOTAL Silvestre 39 40 79 Vestigial 10 11 21 TOTAL 49 51 100 Para corroborar si las proporciones de individuos mutantes y silvestres de esta descendencia. cumplen con la proporción fenotípica 3:1 mostrada en la tabla 2.46 y 1. Tabla 2. Tabla 2.21 21 25 16 0.85 (OBS−ESP)2 Este valor de Chi-cuadrado se encuentra entre 0. Resultados obtenidos En la tabla 2.30 respectivamente.50 y 0. 04 Este valor de Chi-cuadrado se encuentra entre 0.2 DIHIBRIDISMO (F1xF1) A partir de la F1 se separaron 6 hembras y 6 machos ambos silvestres (+vg+eb). 2.70 respectivamente.15 que corresponde a las probabilidades de 0.90 y 0.Machos Hembra s Total 49 51 50 50 1 1 0. las proporciones fenotípicas y genéticas que se esperan en la F2 se muestran en la tabla 2.02 100 100 2 0.04 1 0. +vg+eb +vg+eb X Como la descendencia de la F1 fue toda silvestre y cuyo genotipo es diheterocigoto.1: Resultados esperados para proporciones genotípicas y fenotípicas Hembra Macho ++ +eb vg + vg eb ++ ++ ++ ++ +eb +vg ++ +vg +eb +eb ++ +eb ++ ebeb +vg +eb +vg ebeb vg + +vg ++ vg vg +eb vg vg ++ vg vg +eb vg eb +vg +eb +vg ebeb vg vg +eb vg vg ebeb Proporciones genotípicas: ++ ++= (1/16) ++ +eb= (2/16) ++ ebeb= (1/16) +vg ++= (2/16) +vg +eb= (4/16) Proporciones fenotípicas (3:1) +vg ebeb= (2/16) vg vg ++ = (1/16) vg vg +eb= (2/16) vg vg ebeb= (1/16) .02 0.1 Tabla 2. los que fueron colocados en un frasco.2.2. de las que se obtuvo la F2. indicando con esto que las proporciones obtenidas si se ajustan a las proporciones 3:1 esperadas.016 y 0. 24 . Tabla 2. se observa que en la descendencia se esperaba una proporción fenotípica 9:3:3:1 que corresponde a las características silvestres.2 se muestra la descendencia de 160 individuos obtenidos del cruce después de algunos días. Silvestre (+_+_)= 9/16 Dumpy (vgvg+_) = 3/16 Ébony (+_ebeb) = 3/16 Dumyn.ebony respectivamente.2 0.25 % 18.24441 3 2. que fue el día en el que hizo el primer conteo.25 % Del tablero de Punnett.2.75% 6. cumplen con la proporción fenotípica 9:3:3:1 esperada hacemos uso del estadístico Chi.2.1333 24 13 30 10 36 9 1.2: Resultados obtenidos Silvestre Vestigial Ebany Vestigial ebany Total 41 50 91 17 15 32 13 11 24 7 6 13 78 82 160 Sexo Fenotipo Machos Hembras TOTAL Para corroborar si las proporciones de individuos mutantes y silvestres de esta descendencia.3: Resultados del estadístico Chi.0111 32 30 4 0.cuadrado para la proporción 9:3:3:1 Silvestr e vestigi al Ebony vestigi alEbony TOTAL Descende ncia observad a 91 Descende ncia esperada Diferenci a 90 1 0.9 160 2 (OBS−ESP) ESP GL X 2 (OBS−ESP)2 2. Tabla 2.2.cuadrado. ébony y vestigial .75% 18. vestigial.Ébony (vgvg ebeb)=1/16 56. Resultados obtenidos En la tabla 2. 1 Ligados al sexo +¿ +¿ . dumpy.2.70 respectivamente el que se encuentra dentro del límite de aceptación.05 0. . 3. y utilizando un nivel de 5% podemos decir que nuestros datos obtenidos se ajustan a la proporción de 9:3: 3:1 para los fenotipos silvestre.90 y 0.15 que corresponde a las probabilidades de 0.1 (OBS−ESP )2 0.1 Este valor de Chi-cuadrado se encuentra entre 0.Este valor de Chi-cuadrado se encuentra entre 1.42 y 2.70 y 0.4: Resultados del estadístico Chi.1. Para corroborar si nuestros resultados de individuos machos y hembras se ajustan a la proporción 1:1 para sexo usamos Chi-cuadrado: Tabla 2. ébony y dumpy –ébony respectivamente.05 160 0.1: Proporciones genotípicas y fenotípicas esperadas. Resultados para la F1 (Filial 1) a partir de cruces para caracteres ligados al sexo 3. X ¿ Se cruzó 6 hembras silvestres ( ) con 6 machos mutantes (XwY) X¿ X+X+ X XwY Tabla 3.50 respectivamente.cuadrado para sexo (proporción 1:1) Machos Hembr as Total Descende ncia observad a 78 82 Descende ncia esperada Diferenc ia 80 80 4 4 2 (OBS−ESP ) ESP GL X2 1 0.37 que corresponde a las probabilidades de 0. con lo que podemos decir que nuestros datos obtenidos se ajustan a la proporción 1:1 esperada para sexo.016 y 0. Hembra Macho Xw Y +¿¿ X +¿ X w X¿ +¿ Y ¿ X +¿¿ X +¿ X w X¿ +¿ Y ¿ X Proporciones genotípicas para las hembras: +¿ X w X ¿ = Heterocigotas/ portadoras 100 % Proporciones genotípicas para los machos: +¿ Y ¿ X = Hemicigotos dominante 100 % Proporciones fenotípicas: Hembras= 100% silvestres Machos= 100 % silvestres Del tablero de Punnett se obtuvo que la descendencia fenotípica esperada tanto para hembras y machos sea de 100% silvestres para cada uno. Resultados obtenidos En la tabla 3. Tabla de resultados del estadístico Chi. Tabla 3.1.cuadrado de la proporción 1:1 para sexo .2.1.1.2 se muestra la descendencia obtenida de este cruce después de 22 días de incubación.2: Resultados obtenidos Sexo Fenotipo Machos Hembras silvestre 45 55 Mutante (White) - Como se observa. la descendencia obtenida fue toda silvestre y cumple con el fenotipo esperado mostrado en la tabla 3. 46 y 1.1 LIGADOS AL SEXO (F1xF1) +¿ X A partir de la F1 se separaron 6 hembras silvestres ( X¿ silvestres ( w y 6 machos +¿ Y ¿ X ). X Tabla 4.5 1 55 50 25 0.50 y 0. 4. Por tanto nuestros datos obtenidos no se ajustan a la probabilidad 1:1 para el sexo.07 que corresponde a las probabilidades de 0.30 respectivamente.1 de resultados esperados para proporciones genotípicas y fenotípicas Hembra +¿¿ X Macho +¿¿ X Y +¿ +¿ X ¿ X¿ +¿ Y ¿ X .1.Resultados para la F2 (Filial 2) a partir del cruce F1xF1 para genes ligados al sexo 4.Macho s Hemb ras Total Descende ncia observad a 45 Descende ncia esperada Diferen cia 50 25 0.. Esto significa que nuestra probabilidad escapa del límite del valor crítico 5% necesaria para la aceptación.5 1 100 100 2 (OBS−ESP) ESP G L X2 (OBS−ESP )2 1 1 Este valor de Chi-cuadrado se encuentra entre 0. .2: Resultados obtenidos Sexo Fenotipo Machos Hembras Silvestre 28 45 Mutante (White) 27 - De la descendencia se observa que en las hembras se obtuvo ambos fenotipos al igual que en los machos. Tabla 4.2 se muestra la descendencia obtenida de este cruce después de 16 días de incubación. lo cual se corrobora con los fenotipos esperados.cuadrado.X w +¿ X X¿ w W X Y Proporciones genotípicas para las hembras +¿ +¿ X ¿ = Homocigotas X¿ silvestres 50 % +¿ X w X ¿ = Heterocigotas portadoras 50 % Proporciones genotípicas para los machos: +¿ Y ¿ X = Hemicigotos silvestre X w Y = Hemicigotos mutante 50 % 50 % Proporciones fenotípicas: Hembras= 100% silvestres Machos = 50% silvestres y 50% mutantes (White) Resultados obtenidos En la tabla 4.1.1. Para comprobar si la proporción de individuos hembras y machos obtenidos cumplen con la proporción fenotípica 1:1 hacemos utilizamos Chi. 46 y 1.018 2 (OBS−ESP)2 55 Este valor de Chi-cuadrado se encuentra entre 0.016 y 0. lo cual nos indicaría que nuestra probabilidad está dentro del límite de aceptación del valor crítico 5%. .90 y 0.1.3: Resultados del estadístico Chi.5 1 Este valor de Chi.5 0.cuadrado se encuentra entre 0.Tabla 4.30 respectivamente. Por tanto podemos decir que nuestros valores obtenidos se ajustan a la proporción 1:1 para el sexo.cuadrado para sexo (proporción 1:1) Machos Hembra s Total Descende ncia observad a 55 45 Descende ncia esperada Diferenci a 50 50 25 25 100 100 2 (OBS−ESP ) ESP GL X2 1 1 (OBS−ESP )2 0.0091 27 27.5 0.4: Resultados del estadístico Chi.0091 2 (OBS−ESP ) ESP GL X2 1 0. encontrándose dentro de la región de aceptación con un nivel de significación de 5%.15 que corresponde a las probabilidades de 0.5 0.25 0.1.25 0.50 y 0. Tabla 4.70 respectivamente.cuadrado para la proporción 1:1 para machos Silvestr es Mutant es (White) Total Descende ncia observad a 28 Descende ncia esperada Diferenc ia 27.07 que corresponde a las probabilidades de 0. 889 Según la ley de Hardy – Weinberg: 2 ( p+q) p + 2 pq+ q =1 2 =1 2 Frecuencias fenotípicas observadas: . los resultados se muestran en la siguiente tabla: Tabla 6.2 se realizaron los cálculos.1 para frecuencias alélicas Alelos + Frecuencias alélicas p = 0.111 vg q = 0. Frecuencia alélica 5.1MONOHIBRIDISMO Leyenda: + = Alelo dominante vg= Alelo recesivo Tomando en cuenta los datos de la tabla 2.1.1.5. 21 Frecuencias alélicas esperada: q 2 = 0.2813 = 0.569 vestigial: 32/160 = 0. Silvestre: 79/100 = 0.889 q = 0.79 Vestigial: 21/100 = 0.2 = 0.79 1-p = 0.2813 q = 0.2 Ébano: 24/160 = 0.0813 q 2 +¿ 0.5304 .2DIHIBRIDISMO X Leyenda: Para la característica Vestigial a la característica Ebony += Alelo dominante vg= Alelo recesivo += Alelo dominante eb=Alelo recesivo Frecuencias fenotípicas observadas: silvestre: 91/160 = 0.111 5.2.0813 Par Tomando en cuenta los datos de la tabla 2.2 las frecuencias alélicas obtenidas son: +vg+eb +vg+eb Frecuencias alélicos: Para Vestigial vgvg++¿ (vgvgebeb )+ ¿ = 0.15 Vestigial-Ébano = 13/160 = 0.889 p = 0. 1: Resultados del estadístico Chi.4696 Alelos + dp Frecue ncia alélica p= 0.15 = 0.4809 6.5304 Para Ebony (vgvgebeb )+(++ebeb) = 0.5191 Alelos + eb Frecue ncia alélica p= 0.2313 q = 0.5191 q= 0.1.1 MONOHIBRIDISMO Se colocaron todos los datos para el cálculo del Chi-cuadrado individual por cada grupo como se muestra en la siguiente tabla.0813 + 0.4696 q= 0.cuadrado para la proporción 3:1 esperada de los todos los grupos . Chi-cuadrado de homogeneidad para Monohibridismo 6.2313 q 2 = 0. p = 0. Tabla 6.4809 p = 0. Des cen den cia obs erv ada 79 21 100 Des cen den cia obs erv ada 77 25 Des cen den cia esp era da 75 16 0.853 Dif er en cia 2 G 1 X (OBS−ESP ) ESP (OBS−ESP)2 4 0.053 0. 2 . S i l v e s t r e V e s t i g i a l T o t a l S i l v e s Des cen den cia esp era da 75 Dif er en cia 2 G 1 X2 (OBS−ESP ) ESP (OBS−ESP)2 16 0.64 1 0.213 0. 48 9 .12 0. t r e V e s t i g i a l T o t a l S i l v e s t r e V e s t i g i a l T 23 100 Des cen den cia obs erv ada 25 4 Des cen den cia esp era da Dif er en cia 78 22 100 75 25 1 0.213 2 G 1 X2 (OBS−ESP) ESP (OBS−ESP)2 0.36 1 0.16 0. 9 0. 1.o t a l CHI-CUADRADO TOTAL= 1.36 66 300 75 81 1.1 para el posterior cálculo del Chi-cuadrado homogéneo.44 .1.546 Se obtuvo los datos acumulados de la tabla 6.cuadrado acumuladompara la proporción 3:1 S i l v e s t r e V e s t i g i a l T o t a l Des cen den cia obs erv ada 234 Des cen den cia esp era da 225 Dife renc ia 2G X2 (OBS−ESP ) ESP (OBS−ESP )2 81 0.2: Resultados del estadístico Chi.08 1 1. Resultando la siguiente tabla: Tabla 8. 1MONOHIBRIDISMO Leyenda: + = Alelo dominante vg= Alelo recesivo Tomando en cuenta los datos de la tabla 8.546 – 1. se encuentra entre 1.22 Frecuencias alélicas esperada: .1 para frecuencias alélicas Alelos + Frecuencia s alélicas p = 0.X2Acumulado X2Homogenidad = 1. por lo que estos se ajustan a la proporción de 3:1 para el fenotipo silvestre (++) y vestigial (vgvg).531 vg q = 0.1. X2Homogenidad = X2Total .1 se realizaron los cálculos. los resultados se muestran en la siguiente tabla: Tabla 9. y con un nivel de significación del 5% nuestros datos se encuentran dentro del límite de aceptación.44 = 0. Frecuencia alélica de los datos acumulados 7.469 Frecuencias fenotípicas observadas: Silvestre: 234/300 = 0.39 y 2.22 q²= 0.106 El valor de Chi-cuadrado con 2 grados de libertad obtenido de la diferencia entre los grados de libertad total (GL=3) y el del acumulado (GL=1). 7.50 y 0.30 respectivamente.41 que corresponde a las probabilidades de 0.1.73 Vestigial: 66/300 = 0. 531 .469 q= 0.469 p= 0. 1-p=0. 0 11 3 2 32 30 24 30 13 10 160 4 0.cuadrado para la proporción 9:3:3:1 esperada de los todos los grupos S i l v e s t r e V e s t i g i a l E b o n y V E T o t Desc ende ncia obse rvad a 91 Desc ende ncia espe rada 90 Dif er en cia G X2 2 (OBS−ESP) ESP (OBS−ESP )2 1 0. Tabla 8. 8.1 33 36 1.1 DIHIBRIDISMO Se colocaron todos los datos para el cálculo del Chi-cuadrado individual por cada grupo como se muestra en la siguiente tabla.2 9 0.9 . Chi-cuadrado de homogeneidad para Dihibridismo 8.1: Resultados del estadístico Chi.1. 5 Desc ende ncia obse rvad a 51 9 96 Desc ende ncia obse rvad a 58 Desc ende ncia espe rada 56.0 0.0 2 .25 Dif er en cia G X 2 (OBS−ESP) ESP (OBS−ESP)2 5.5 21 18 9 0.a l S i l v e s t r e V e s t i g i a l E b o n y V E T o t a l S Desc ende ncia espe rada Dif er en cia G 3 X2 (OBS−ESP)2 ESP 2 (OBS−ESP) 54 9 0.1 67 2 15 18 9 0.5 6 9 1. 5 62 5 0.1 para el posterior cálculo del Chi-cuadrado homogéneo.0 62 5 0.1 63 20 18.75 7.4 03 6.817 Se obtuvo los datos acumulados de la tabla 8.2 5 5 100 CHI-CUADRADO TOTAL = 5. i l v e s t r e V e s t i g i a l E b o n y V E T o t a l 62 5 9 3 0 17 18.75 3.25 1. Resultando la siguiente tabla: .1.5 62 5 0. 1735 = 4.2: Resultados del estadístico Chi.817 – 1.5 625 1.70 y 0.00 03 3 64 66.56 25 0.1.06 25 0. se encuentra entre 3. 17 35 .25 Difer enci a 2G 0.83 y 5. Tabla 8.X2Acumulado X2Homogenidad = X2 (OBS−ESP ) ESP (OBS−ESP)2 5.01 40 356 X2Homogenidad = X2Total .04 59 27 22. 25 22. y con un nivel de significación del 5% nuestros datos se encuentran 1.06 25 0.11 33 65 66. 75 3.50 respectivamente. 75 7.cuadrado de homogeneidad para la proporción 9:3:3:1 S il v e s tr e V e s ti g ia l E b o n y V E T o t al Des cen den cia obs erv ada 200 Des cen den cia esp era da 200 .6435 El valor de Chi-cuadrado de homogeneidad con 6 grados de libertad obtenido de la diferencia entre los grados de libertad total (GL=9) y el del acumulado (GL=3).35 que corresponde a las probabilidades de 0. dentro del límite de aceptación. eb q = 0. por lo que estos se ajustan a la proporción de 9:3:3:1 para los fenotipos silvestre ( ++ ¿ ¿ .1826 Vestigial-ebony: 27/356 = 0. ( p+q)2 =1 p2+ 2 pq+ q2=1 Frecuencias fenotípicas observadas: Silvestre: 200/356 = 0.1. los resultados se muestran en la siguiente tabla: Tabla 9. Frecuencia alélica de los datos acumulados 9. vg q = 0.1798 Ebony: 65/356 =0. 9. ebony ( +ebeb ¿ y V-E (vgvg ebeb ¿ .0758 Según la ley de Harley – Weinberg: Frecuencias alélicas esperada: Para Vestigial Para Ebony .5618 Vestigial: 64/356 = 0.1 para frecuencias alélicas Vestigial Ebony Alelos + Frecuencia s alélicas p = 0.1 DIHIBRIDISMO Leyenda: + = Alelo dominante vg = Alelo recesivo para vestigial eb = Alelo recesivo para ebony Tomando en cuenta los datos de la tabla 8.2 se realizaron los cálculos.1. vestigial ( ¿ vgvg +¿ ¿ . + p = 0. 2556 (vgvgebeb) +¿ (++ ebeb) = 0.4917 .5083 p = 0.5056 p = 0.2584 q 2 q = 0.4944 = 0.2584 = 0. (vgvgebeb) +¿ vgvg ++ = 0.0758 +¿ 0.0758 +¿ 0.1826 = 0.1798 = 0.2556 q q 2 = 0. Ma cho He mb ra Tot al Tabla 10.1: resultados de la corrección de Yates para la prueba chi-cuadrado para la proporción esperada 9:3:3:1 Silve stre Dum py Ebon y Dum pinEbon Desc ende ncia obse rvad a 6 Des cen den cia esp era da 2.1: Resultados obtenidos Silv est re 2 Du mp y - 4 1 6 1 Ebo ny 2 2 Dump yEbony 1 1 Total 4 6 10 La tabla nos muestra una descendencia con tres de los fenotipos.5) ESP ❑ (OBS−ESP ) 3. Como la descendencia es muy pequeña hacemos huso de la corrección de Yates Tabla 7. Cruce de prueba para Dihibridismo Se hizo este tipo de cruce para definir el genotipo de una hembra silvestre. obteniendo en a F2.5 Difer enci a 2 ( ( OBS−ESP )−0.5 -1.25 0. que nos indica que el genotipo de la hembra tuvo que ser necesariamente diheterocigota vg+eb+ para que cumpla con lo obtenido.5 -1.10.5 2 2. .5 1 2.225 G 1 1 1 1 X2 4.25 3.225 -0.5 1 2.6 0 0. por lo que podemos decir que nuestra descendencia si se ajusta a la proporción 1:1 para sexo.1 X El chi-cuadrado obtenido se encuentra entre los valores 0.016 y 0. por lo que podemos decir que nuestra descendencia si se ajusta a la proporción 9:3:3:1.5)2 ESP G 1 (OBS−ESP)❑ -1 0.y Total 10 10 3 4.90 y 0.05 0.30 y 0.20 respectivamente.05 El chi-cuadrado obtenido se encuentra entre los valores 3.70 respectivamente. el que se encuentra dentro del rango aceptable. 2 . 6 10 5 1o 1 0.05 1 0. Tabla 7. el que se encuentra dentro del rango aceptable.64 que pertenecen al rango de probabilidad de 0.2: Resultados de la corrección de yates para chicuadrado para la proporción 1:1 de sexo M a c h o s H e m b r a s T o t a l Desc ende ncia obse rvad a 4 Des cen den cia esp era da 5 Dif ere nci a ( ( OBS−ESP )−0.67 y 4.15 que pertenecen al rango de probabilidad de 0. para los cálculos de chi-cuadrado primero se tuvo que realizar un promedio de la descendencia para cada ensayo y luego someter estos datos a la prueba del estadístico. donde en todos los casos se usó un nivel de significancia del 5%. DISCUSIÓN DE RESULTADOS Las primeras cruzas se realizaron con parejas de líneas puras encontrándose siempre el los frascos rotulados con el numero I. y cuando se logró obtenerla no fue la esperada debido a que algunas larvas no lograron completar su desarrollo perdiendo de esta manera número de descendientes. por lo que en todas las F1 siempre se obtuvo individuos de fenotipo silvestre. en la F1 del frasco II como el macho parental era mutante para el carácter. se separaron hembras y machos obtenidos de la F1. toda la descendencia presento fenotipo silvestre debido al fenotipo silvestre de la hembra. todas las F1 se encuentran dentro la zona de aceptación. de igual manera los valores de chicuadrado para las proporciones de sexo para cada caso si cumplen con la proporción 1:1 esperada.IV. de 28-20 dias. corroborando de esta manera que si cumplían con la probabilidad esperada. comprobando de este modo la herencia ligada al cromosoma “X” para la mutación White. Para la obtención de la F2. demostrando con esto que en la descendencia obtenida el número de machos y hembras se ajustan a la proporción 1:1 esperada. a la hembra de genotipo y fenotipo mutante y en los frascos rotulados con el número II a los machos también con las mismas características. y de genotipo heterocigoto en el caso de monohibridismo y diheterocigoto en el caso de dihibridismo. se utilizó la mutación White ligado al cromosoma “X”. siendo todos los machos mutantes (White). En el caso de la F2 de dihibridismo II. que pudo ser debido a que el tiempo para la aparición de las primeras larvas y pupas fue mucho. en la F1 para el frasco I todas las hembras cumplían con el fenotipo silvestre esperado. cabe resaltar que se realizaron dos ensayos para esta cruza. los valores del chi-cuadrado para la proporción fenotípica en cada caso. por tal motivo se obtuvo gran descendencia. En las cruzas para genes ligados al sexo. tanto para monohibridismo y dihidridismo. Para alguno de los cálculos se tuvo que hacer uso de la corrección de Yates. debido a esto solo se realizó el análisis de chi-cuadrado para el sexo para comprobar si la descendencia obtenida cumplía con la proporción 1:1.De los resultados del chi cuadrado. provocando que el medio de cultivo se dañase antes de obtener la F1. se obtuvo hembras con fenotipo silvestre y . esto debido a la poca descendencia obtenida. estuvieron dentro de la zona de aceptación con una probabilidad de aceptación promedio del 70%. Para la F2 obtenida del frasco I. en esta descendencia la proporción fenotípica esperada es de 9:3:3:1 ya que la cruza se realizó entre diheterocigotos silvestres. lo mismo se hizo para los machos obteniendo de igual modo un chi-cuadrado aceptable.476 que corresponde al alelo recesivo (vg) y 0.524 para el alelo dominante (+). de igual forma en el frasco I se encontraba la hembra mutante. en cuanto al frasco II para el locus tipo . esto debido a que los parentales murieron muy rápido antes de dejar descendientes. Para los cruces de genes ligados. corroborando con esto que se obtuvo una mayor expresión por parte del alelo silvestre por lo que se justifica la mayor cantidad de descendientes de fenotipo silvestre. obteniendo en la F1 solo machos mutantes. y por la presencia de contaminantes en el medio que dificultaron el rápido desarrollo. no obteniendo los datos necesarios para el mapeo de estos genes ya que para logar esto se necesita del número de descendientes recombinantes presentes en la F2. Para la F2 del frasco II. por lo que se tuvo que realizar un chi-cuadrado y determinar si cumplían con la proporción fenotípica 1:1 que representa al 50% de machos silvestres y el otro 50% a machos mutantes esperados. en cuanto al frasco II se obtuvo una mayor expresión del alelo recesivo. solo en el caso de la F1 del frasco II. no se pudo corroborar esto ya que el número de hembras era más del doble del número de machos. para el caso de monohibridismo I se obtuvo una frecuencia alélica de 0. dejando como inconcluso esta parte de la experiencia. La obtención de las frecuencias alélicas para los caracteres estudiados. y se obtuvo machos tanto silvestres como mutantes. demostrando con esto que los genes involucrados estaban ligados en la parte homologa del cromosoma “X”. teniendo que realizar el cálculo de chi-cuadrado para la proporción 1:1 que representa al 50% de hembras silvestres y al otro 50% de hembras mutantes esperadas. mutante. No se pudo realizar ninguna cruza para la obtención de la F2. la cantidad de individuos obtenidos en la F1 para ambos casos fue minina siendo solo de 4 en el caso del frasco II. el valor de este chi-cuadrado nos permitió corroborar que las hembras si se ajustaban a la proporción fenotípica mencionada. el valor del estadístico nos determinó de que si se ajustaban a la proporción mencionada. todas las hembras fueron silvestres. por lo ya mencionado anteriormente. en la F1 del frasco II el mutante era el macho por lo que la descendencia fue toda silvestre. justificando también de este modo la mayor preponderancia de denscendientes mutantes para esta cruza. en dihibridismo I en cuanto al locus para el tipo de alas hubo una mayor expresión por parte del alelo recesivo (dp) y para el locus que codifica el color del cuerpo hubo una mayor expresión por parte del alelo silvestre (+). se realizaron a partir de la F2 para los ensayos donde se tuvo descendencia. De igual forma el uso del estadístico nos permitió aceptar que la proporción del número de machos y hembras se ajustaba a la proporción 1:1. para la población denominada como “monohibridismo I”. se realizaron cuatro ensayos para cada cruza mencionada. como el azúcar. que con la misma finalidad se sometieron a seguimiento las cruzas mencionadas. estos ensayos estuvieron a cargo de cuatro grupos. se tuvo una mayor frecuencia por parte del alelo dominante (+) explicando la mayor cantidad de individuos silvestres. El cuidado en el proceso de elaboración de medios es crucial pues una mala proporción en la cantidad de los elementos. Se realizó una cruza de prueba para determinar el genotipo de una hembra de fenotipo silvestre obtenida en la F2 de Dihibridismo. o un descuido sobre este puede ocasionar la muerte de la descendencia. Las poblaciones de drosophyla sometidas a prueba se encontraban en equilibrio ya que las condiciones ambientales fueron constantes para todos los ensayos. nos dan indicios de que la hembra posee un genotipo diheterocigoto. por lo que podemos afirmar con certeza que la sola presencia de esta mosca doble mutante nos asegura el genotipo mencionado de la hembra. en la población “monohibridismo II” se encontró una mayor frecuencia para el alelo recesivo (vg). esto porque se encontró una mosca dumpy-ebony que solo es posible obtenerla siempre que la hembra presentase genotipo diheterocigoto para las características. las poblaciones se encontraban aisladas de otras por lo que no hubo migraciones que alterasen el equilibrio. esto ya que se encontraron varios de estos pegados al medio los que . Con el fin de determinar las frecuencias alélicas presentes en una población de Drosophyla sp. Con el incremento de la temperatura de incubación se ha demostrado que Drosophila acelera su ciclo de vida. se realizó la prueba de chi-cuadrado para cada ensayo correspondiente para luego llevar todos los datos a una tabla de chicuadrado de homogenidad y a partir de estos cálculos determinar las frecuencias alélicas correspondientes. por lo tanto la eclosión de las pupas toma menos tiempo y se tiene una mayor proliferación de descendencia .En la experiencia realizada notamos que el ciclo estándar de 14 a 16 día se ve incrementado al doble es decir uno 25 a 30 días esto puede ser debido a que la incubadora en realidad presentaba una menor temperatura a la estándar. poseía cruzamientos al azar. cumpliendo con la mayoría de los requisitos para poder considerar a una población en equilibrio según Hardy-Weiberg. Las frecuencias alélicas encontradas a partir de los datos del chicuadrado de homogenidad. que se obtuvieron debido al poco tiempo del que se dispuso para realizar el ensayo. de alas la mayor expresión fue por parte del alelo recesivo (dp) y para el locus que codifica el color del cuerpo el alelo recesivo (eb) obtuvo la mayor expresión. los poco primeros descendientes. ya que fue inevitable que algunas de las moscas escapen. . esto puede justificar al ensayo para genes ligados al sexo II. es uno de los más usados para determinar la influencia que tienen el azar en los cruces y en la descendencia obtenida.05 se rechazaría la proporción fenotípica experimental. de igual forma los diferentes fenotipos obtenidos corroboraron el concepto de dominancia. el que permite verificar si los datos observados se ajustan a los esperados. esto se pudo comprobar con las generaciones obtenidas tanto en F1 y F2 para cada ensayo. produciendo esto un aumento del valor del estadístico por lo que con un nivel de signicancia de 0. Se logró comprobar con los ensayos hechos para genes ligados al sexo los postulados de Morgan. El desajuste en el valor de chi-cuadrado también se vio afectados por errores por parte de los experimentadores al momento del conteo. V. CONCLUSIONES Con el desarrollo de los ensayos. se pudo comprobar las leyes de Mendel. esta codificada en el cromosoma ” X” en la parte no homologa de los cromosomas sexuales. es de fundamental importancia cuando solo se conoce el fenotipo de un individuo. se obtiene el genotipo de dicho individuo a partir de los fenotipos obtenidos en la descendencia. de igual modo se comprobó la segregación independiente de los caracteres. murieron sin proliferar o apenas proliferar. El uso del estadístico de Chi-cuadrado. así como también la fiabilidad que tenemos para aceptar como correctos los datos obtenidos en la experiencia. lo que puedo causar un desajuste en la elaboración del Chi-cuadrado. Una cruza de prueba. y que al cruzarlo con su mutante respectivo (dependiendo si el fenotipo es codificado por un gen o por dos genes). que la característica ojos White. a partir de líneas puras la primera generación es siempre hibrida y silvestre. y el dimorfismo sexual que existe entre hembras y machos. también se pudo entender el ciclo de vida que presenta y la duración de este. . Se determinó las características morfológicas externas de Drosophila adulta. P. y Col. México. Lewontin. (1999). F.nih. Suzuki.TOC : Libro: An Introduction to Genetic Analysis. Castañeda.blogspot. McGraw-Hill. Facultad de Ciencias.org/ Mendelweb: Diferentes versiones y traducciones del artículo escrito por Mendel. A.html Sociedad Andaluza de Medicina Intensiva. William M.ncbi. Filosofía e historia de la biología. (2008).fcgi? call=bv. Pearson Educación S. FES Iztacala. notas. Spencer (2006) Conceptos de Genética. Drosophila melanogaster. Mexico. Jeffrey H. comentarios.VI. ejercicios. 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Mapa genético del cromosoma 2 de Drosophila sp con sus Fig respectivos sitios de mutación (Watson D. Madrid. Medio Agar Levadura con su respectivo tapón Fig 02.Editorial Panamericana.) . Drosophila sp pupa macho Drosophila sp silvestre (+/+) Fig 06. Drosophila sp pupa hembra Fig 05. Drosophila sp silvestre (+/+) Fig 08. Drosophila sp mutación ébony . Drosophila sp mutación vestigial Fig 9. Fig 04. Fig 07. .