ESPE Carrera de Ingeniería en Biotecnología Química Ambiental NOMBRE: Paula Piedra. FECHA: 26/11/2009 1.TEMA: Métodos analíticos usados en la determinación de Aceites, Detergentes y Plaguicidas en el agua. 2. OBJETIVOS: Investigar todo lo referente a los métodos analítico s que se emplean en la determinación de aceites detergentes y plaguicidas en el agua. Identificar de una manera general en que magnitud contaminan el agua estas sustancias y analizar cuan efectivos son estos métodos para la determi nación de las mismas. 3. MARCO TEORICO: Método de Extracción Soxhlet (Determinación de Aceites) 1. FUNDAMENTO Sólo los aceites y las grasas sólidas o viscosas presentes se separan de las muestras líquidas por filtración. Después de la extracción en un aparato Soxhlet con hexano, se pesa el residuo que queda después de la evaporación del disolvente para determinar el contenido en aceite y grasa. Los compuestos que volatilizan a 103ºC se perderán cuando se seque el filtro. Se elige el Método Soxhlet para fracciones relativamente polares, o cuando los niveles de grasas no volátiles pueden amenazar el límite de solubilidad del disolvente. El extractor Soxhlet o simplemente Soxhlet (en honor a su inventor Franz v on Soxhlet es un tipo de material de vidrio utilizado para la extracción de compuestos, generalmente de naturaleza lipídica, contenidos en un sólido, a través de un solvente afin. El condensador está provisto de una chaqueta de 100 mm de longitud, con espi gas para la entrada y salida del agua de enfriamiento. El extractor y y tiene una capacidad, hasta la parte superior del sifón, de 10 ml; el diámetro interior del extractor es de 20 mm y longitud de 90 mm. El matraz es de 500 ml de capacidad. Esta conformado por un cilindro de vidrio, vertical de aproximadamente un pie de alto y una pulgada y media de diámetro. La columna está dividida en una cámara superior e inferior. La superior o cámara de muestra sostiene un sólido o polvo del cual se extraerán compuestos. La cámara de solvente, exactamente abajo, contiene una reserva de solvente orgánico, éter o alcohol. Dos tubos vacíos, o brazos corren a lo largo, a un lado de la columna para conectar las dos cámaras. El brazo de vapor, corre en línea recta desde la part e superior de la cámara del solvente a la parte superior de la cámara del sólido. El otro brazo, para el retorno de solvente, describe dos U sobrepuestas, que llevan desde la cámara de la muestra el solvente hasta la cámara de solvente. El soxhlet funciona cíclicamente, para extraer las concentraciones necesarias de algún determinado compuesto. Éste funciona de la siguiente forma: Cuando se evapora el solvente sube hasta el área donde es condensado; aquí, al caer y regresar a la cámara de solvente, va separ ando los compuestos, hasta que se llega a una concentración deseada. Esto puede ocasionar problemas con algunos compuestos, que con los ciclos llevan a la ruptura del balón, como lo es en la extracción del ámbar. 2. INTERFERENCIAS El método es completamente empírico y pueden obtenerse resultados duplicados sólo con ajustarse de forma estricta a todos los detalles. Por definición, cualquier sustancia recuperada es aceite y grasa, por lo que cualquier sustancia soluble en el disolvente será extraída como aceite y grasa. La velocidad y el tiempo de extracción en el Soxhlet deben ser exactamente los especificados, así como el tiempo de secado y enfriado del material extraído. Puede producirse un incremento gradual de peso debido a la absorción de oxígeno, y/o una pérdida gradual de peso debido a la volatilización. 3. MATERIAL - Equipo de extracción Soxhlet. - Embudo Buchner. - Tela de muselina. - Filtro Watman 40. - Matraz de fondo redondo. - Algodón. - Dedal de extracción: papel. Colocar el cartucho desecado en el cuerpo de extracción de Sohxlet. Se introducen en este cartucho los filtros utilizados doblándolos con ayuda de unas pinzas en una especie de rollitos. . Se filtra la muestra acidificada por la compresa filtrante preparada. 5.n-Hexano. cerrar bien el cartucho.2. Limpiar el interior y la tapa de la botella de muestra y el interior del embudo de Buchner con algodón impregnado en hexano para quitar toda la película de aceite e introducirlo en el cartucho. PROCEDIMIENTO 5. REACTIVOS . Tarar un matraz de fondo redondo previ amente limpiado con mezcla crómica. que se continúa hasta que no pase más agua por el filtro. Montar el dispositivo para la extracción. Desecar el cartucho en estufa a 103ºC durante 30 min exactamente. Una vez realizada esta operación.. Toma de Muestra y Almacenamiento Recoger una muestra representativa en una botella de cristal de boca ancha aclarada con el disolvente para eliminar cualquier película de detergente. Colocar el papel de filtro entre los dos discos de tela. Introducir en él algodón con suficiente hexano. de tierra en 100 ml de agua destilada. Nota. Confeccionar un cartucho de papel de filtro. y acidúlese en el frasco de muestra con HCl concentrado hasta un pH 2. PA. añadiendo la cantidad de hexano suficiente (unos 250 ml.Suspensión de tierra de diatomea: 1 g. se lava con tres volúmenes de 100 ml de agua destilada. mediante vacío.1.). Se prosigue el vacío hasta que no pase más agua a través del filtro. La extracción debe hacerse con una frecuencia de 20 ciclos/h muselina del - . Método de Extracción de Soxhlet Después de la preparación de la muestra. luego. preparar dos discos de tela de mismo diámetro que el papel de filtro ( Watman 40). Se marca el frasco de muestra a la altura del menisco de agua para la determinación posterior del volumen de la muestra. 5. y usando el vacío pasar por el filtro 100 ml de tierra de diatomea.4. 65ºC . para eliminar todo resto de grasas.Ácido Clorhídrico concentrado.Recoger una muestra separada para hacer esta determinación y no subdividir en el laboratorio. desecado en estufa durante 30 min y enfriado a temperatura ambiente en un desecador. Concluida la extracción. ³Quimica Ambiental´ 2da Edicion. en miligramos. Volumen de muestra. el iminar el disolvente por destilación (un rotavapor). Interferencias: El triclorotrifluoroetano tiene la capacidad de disolver no sólo aceite y grasas sino también otras sustancias orgánicas. Tara del matraz de extracción. La temperatura debe mantenerse a unos 70 ºC.° 2. Barcelona. en litros. Dejar desecar el matraz y pesar (P2). VMUESTRA. los residuos más pesados del petróleo pueden contener una porción significativa de los materiales que no son extraíbles con el disolvente. Ningún disolvente conocido disolverá de forma selectiva sólo aceite y grasa. La eliminación del disolvente tiene como resultado la pérdida de los hidrocarburos de cadena corta y aromáticos encillos por volatilización. en miligramos. 6. 1 Método de partición -gravimetría Principio: El aceite o la grasa disuelta o emulsionada es extraída del agua por íntimo contacto con el triclorotrifluoroetano. CALCULOS Grasa total. en consecuencia. extraíbles. P2. Editorial REVERTÉ. Además.Pp:192-195 . Peso bruto del matraz de extracción. 1 Baird C. se oxidan con rapidez.durante 4 horas que se miden desde el primer ciclo. en mg/l = [ ( P2 .P1 ) *1000 / VMUESTRA (L) P1. se incluyen precauciones especiales con respecto a la temperatura y desplazamiento de vapor del disolvente para reducir este efecto. determinado por relleno de la botella de muestra hasta la línea de calibración. En este proceso se pierden cantidades significativas de destilados del petróleo desde la gasolina hasta el aceite combustible n. Algunas grasas y ácidos grasos especialmente no saturados. 2001. Colóquese el matraz en un baño de agua a 70 °C durante 15 minutos y extráigase aire a su través aplicando el vacío durante el minuto final. del matraz tarado menos el residuo calculado. d) Papel de filtro : diámetro 11 cm. A. Sin embargo. B. c) Baño de agua. en general 5 ml de HCl es suficiente. b) Triclorotrifluoroetano. Si no es posible obtener una capa clara de disolvente. Cálculos Si el disolvente orgánico está libre de resi duos. Recójase una muestra de 1L y márquese el nivel de la muestra en la botella para determinar después el volumen de la muestra acidifíquese hasta pH 2 o inferior. c) Sulfato de sodio cristal anhidro. Aclárese con cuidado la botella de muestra con 30 ml de triclorotrifluoroetano y añádanse los lavados del disolvente al embudo de separación.Instrumental a) Embudo de separación: 1 l. la ganancia de peso del matraz de destilación tarado se debe principalmente al aceite y la grasa. añádase 1 g de Na 2 SO 4 al cono del papel de filtro y drénese lentamente el disolvente emulsionado sobre los cristales. Háganse dos extracciones más con 30 ml de disolvente cada vez pero aclárese primero el envase de la muestra con cada fracción del disolvente. La ganancia total de peso. Déjense que se separen las capas. Reactivos a) Ácido clorhídrico. HCl. Pásese a un embudo de separación. Enfríese en un desecador durante 30 minutos y pésese. agítese con suavidad durante 5 a 10 minutos. del blanco del disolvente es la cantidad de aceite y grasa de la muestra: . Añádase más Na 2 SO 4 si es necesario. 1 + 1. b) Matraz de destilación: 125 ml. si se sospecha que se formará una emulsión estable. Es preferible agitar vigorosamente durante 2 minutos. con llave de paso de TFE*. Drénese la capa de disolvente a través del embudo que contenga papel de filtro humedecido con el disolvente en un matraz de destilación limpio y tarado. Combínense los extractos en el matraz de destilación tarado y lávese el papel de filtro con otros 10 a 20 ml del disolvente. Destílese el disolvente del matraz de destilación en un baño de agua a 70 °C. los destilados ligeros del petróleo. por volumen. del 37. Recójanse extractos combinados en u n matraz volumétrico de 100ml y ajustese el volumen final a 100ml. con excepción de la gasolina. con llave de cierre de TFE*. registrador. d) Papel de filtro: Diámetro 11 cm. Reactivos a) Ácido clorhídrico: HCl b) Triclorotrifluoroetano c) Sulfato de sodio. c) Células: Sílice infrarrojo próximo. con disovente. b) Espectrofotómetro infrarrojo: Doble haz. la acidificación y la extracción. d) Aceite de referencia: Prepárese una mezcla. La instrumentación adecuada permite determinar concentraciones tan pequeñas de aceite y grasa como 0. Tápese el matraz y pésese aproximando hasta el miligra mo. Por tanto. el 37. Almacénese en un envase sellado para evitar la evaporación. Instrumental a) Embudo de separación: 1 litro. Este método ofrece un cierto grado de selectividad para solventar alguna s de las interferencias de coextracción comentadas en el método B. Procedimiento Remítase al método B para la recogida de muestra.0 g) del aceite a un matraz volumétrico de 100 ml tarado. pueden ser medidos con exactitud.Método de partición infrarrojo Aunque el procedimiento de extracción para este método es idéntico que para el método B. Prepàrese una solución de reserva alrededor de 1 ml (0. Los residuos más pesados del petróleo pueden contener una porción significativa de materiales insolubles en el triclorotrifluoroetano. .2 mg/l. anhidro.5 a 1.5 por 100 de isooctano.5 por 100 de hexade cano y del 25 por 100 de benceno. la detección infrarroja permite medir muchos hidrocarburos relativamente volátiles. 200 cm -1 hasta 2. selecciónese una longitud de trayectoria más corta o dilúyase si es necesario. ocasionan la Eutrofización cultural del agua. Romero. El poder contaminante de los detergentes se manifiesta en los vegetales acuáticos inhibiendo el proceso de la fotosíntesis originando la muerte de la flora y la fauna acuáticas. Y por otro lado los detergentes por poseer moléculas nutrientes.:301-303 . Las industrias pueden presentar este contaminante en sus aguas residuales siempre y 2 J. midiendo la absorbancia de l pico máximo a 2. como el fosfato. Pp. A los peces les produce lesiones en las branquias. 2 Cálculos Método de Sustancias Activas al Azul de Metileno (SAAM) (Identificación de Detergentes) La mayoría de los detergentes sintéticos son contaminantes persistentes debido a que no son descompuestos fácilmente por la acción bacteriana.930 cm -1 y restando la absorbancia de la línea base en este punto. dificultándoles la respiración y provocándoles la muerte. Mídanse las absorbancias de las muestras y los patrones construyendo una línea base recta en todo el intervalo de estudio. A los detergentes que no son biodegradables se les llama detergentes duros y a los degradables. Examínense los patrones y las muestras desde 3.700 cm -1 con disolvente en el haz de referencia y anótense los resultados en el papel de absorbancia. Usando las técnicas volumétricas. Si la absorbancia es superior a 0. detergentes bland os. prepárese una serie de patrones que cubran el intervalo de interés. Colombia 2000 ³Calidad del agua´ 2da edición.8 para una muestra. Léase la absorbancia de los patrones en el mismo intervalo para una curva de calibración. Selecciónese un par de células de sílice de infrarrojo próximo equiparables.Añádase disolvente para disolver y diluir hasta la marca. Una célula de longitud de trayectoria de 1 cm es apropiada para un intervalo de funcionamiento de aproximadamente 4 a 40 mg. Si la identidad del aceite es desconocida utilícese un aceite de referencia como patrón. etileno SAA ). un tinte cati nico. Esto ocurre a través de la formaci n de un par i nico el cati n Azul de etileno. es más frecuente la utilizaci n de detergentes cati nicos sales cuaternarias de amonio) a ue se necesita mantener asepsia en los procesos de elaboraci n. as SAA ét do de Sustancias Activas al o llevan a cabo la transferencia del azul de metileno. En la industria agroalimentaria por ejemplo. El método es aplicable a concentraciones de SAA sulfonato de alquilbenceno lineal SA ) es el surfactante ani nico mas utilizado . adquiriendo especial relevancia en las aguas de tipo domésticas Para determinar detergentes ani nicos se utiliza el Azul de inmiscible.cuando utilicen estos oductos como agentes de limpieza. mg/l. os surfactantes ani nicos se encuentran entre las más destacadas de las sustancias que muestran activida al d azul de metileno por lo que el método es utilizado para determinar detergentes en aguas naturales aguas residuales. la determinaci n del color azul en el cloroformo por espectrofotometría a inferiores a . cuantificar omprende tres extracciones sucesivas en cloroformo a partir de medio acuoso ácido que contenga azul de metileno en exceso . desde una soluci n acuosa a un líquido orgánico asta el equilibrio. El se nm. seguidas de lavado por contracorriente con agua. especialmente con fines de desengrase. os detergentes ani nicos son uno de los posibles contaminantes encontrados en las aguas residuales. a intensidad de color azul entre el ani n SAA resultante en la fase orgánica es una medida de las SAA . constituye la fase acuosa. ´ Un agua natural o residual contaminada con detergentes. Cuando se agrega azul de metileno se genera el par iónico Azul de Metileno -SAAM. se observará la formación de dos fases. pero si se le agrega una porción del cloroformo. Las SAAM en la fase clorofórmica se valoran por medio de determinación de absorbancia mediante es pectrofotometría. Materiales y equipos Ampollas de decantación de 250 ml Filtro Matraces Pipetas Vasos de precipitado Probetas Tubos de ensayo Espectrofotómetro Visible Reactivos Cloroformo Solución indicadora de fenolftaleina Reactivo azul de metileno Acido sulfúrico 1 N y 6 N Solución de lavado: Ácido sulfúrico 6 N y fosfato diácido de sodio Procedimiento: Preparación de la curva de calibración: Se prepara con solución SAL patrón. El alquilbenceno sulfonato puede ser identificado y cuantificado por espectrofotometría infrarroja después de la purificación. . Hasta ahí solo se tendría la fase acuosa. Agitando el sistema se produce la transferencia del par iónico desde la fase acuosa a la fase clorofórmica.emplea para estandarizar el método SAAM. La intensidad de coloración azul resulta proporcional a la concentración de detergente aniónico. ya que este último es inmiscible con la fase acuosa. Alternativamente se puede realizar la valoración por medio de comparación visual en escala cromática. tiñéndose esta última de color azul. 080 0. Medir 25 ml de muestra a analizar e introducir en ampolla de decantación de 250 ml.:301-303 .025-0.08-0. Separar la capa clorofórmica. acidificar con ácido sulfúrico 6N hasta incoloro. Colocar 10 ml de cloroformo medido en probeta y agitar suavemente durante 1 minuto. Agregar 2 gotas de fenolftaleina. Dejar reposar hasta que se separen las fases. Separar fase clorofórmica en vaso de precipitado y desechar la fracción acuosa que queda en la ampo lla.Determinación De Sustancias Activas Al Azul De Metileno (Saam).40 0. recibiendo el filtrado en matraz de 25 ml.Pp. Realizar lectura de concentración en espectrofotómetro 3 3 Miguel Aguilar Romo. 2001.4-2. introducirlo en la ampolla. Medir en probeta 20 ml de solución de azul de metile no y agregar a la ampolla. Agitar suavemente durante 1 minuto y dejar reposar hasta separación de fases. Agregar nuevamente la fase clorofórmica a la ampolla y. Completar con agua destilada a 100 ml. pasando por filtro. Si resulta una tonalidad rosada. enjuagando el vaso de precipitado con 50 ml de líquido de lavado repartido en 2 o 3 alícuotas.0 esperada (mg/l) 400 250 100 Muestra tomada (ml) Si la concentración de SAAM esperada es superior a 2 mg/l se diluye la muestra que contenga 40 a 200 ug de SAAM hasta 100 ml con agua. Análisis De Aguas . Tamaño de la muestra: Para el análisis directo de las aguas limpias y residuales se selecciona el volumen de muestra sobre la base de la concentración de SAAM esperada: Concentración de SAAM 0. Enrasar el matraz con cloroformo. Materiales a) ancelador b) Botella de lavado de gas c) Embudo de separación d) Equipo de filtración e) eacti a) edidor de flujo de gas s itrógeno b) Acetato de etilo c) Bicarbonato de sodio d) loruro de Sodio libre de surfactantes e) Agua ¦ ¥ ¤£ ¢ ¡ . El surfactante es absorbido en la es transportado a la capa de acetato de etilo. El evapora. deshidrata adecuado para el análisis. Se consigue burbujear una corriente de nitrógenos muestra interfase agua-gas de las burbujas disolvente se separa. Li it i aciendo acia arriba en una columna que contenga la una capa de acetato de etilo por encima. dejando al surfactante como residuo El proceso de cancelación solo separa los surfactantes disueltos. si hay materia en partículas esta retiene una cantidad del surfactante adsorbido en equilibrio.S i l i Este proceso aísla el surfactante de la soluci n acuosa diluida produciendo un residuo seco relativamente libre de sustancias no surfactantes. riñones y otros órganos. S son los mL de alícuota de la muestra. Una vez absorbidos. Suelen aplicados en estado líquido en forma de aerosol sobre el cultivo o suelo. aunque algunas veces se incorporan directamente como sólidos (polvo o gránulos) o a través del tratamiento de las semillas. se establece entonces un equilibrio de concentraciones entre los elementos grasos y proteicos constitutivos de la sangre y otros tejidos ricos en grasas. como pueden ocurrir en situaciones de tensión o enfermedad. especialmente el tejido adiposo. La acumulación de estos plaguicidas en le tejido adiposo impide que lleguen a sitios críticos del sistema nervioso. los plaguicidas organoclorados pasan a la sangre y son distribuidos por todo el organismo. estos productos se movilizan también y pueden llegar a estar en la sangre en concentraciones suficientes para causar signos de intoxicación aguda. dependiendo de la dosis absorbida. la concentración aparente de sulfonato de alquilbenceno lineal como se indica a continuación: SAAM. También se pueden encontrar diferentes concentraciones en el hígado. a esta cantidad se le agregan las procedentes de la leche materna. por lo que son altamente persistentes.CÁLCULOS Calcular y expresar como SAAM. Los plaguicidas organoclorados también atraviesan la barrera placentaria y se encuentran en concentraciones importantes en el feto. METODO DE CROMATOGRAFIA DE GASES (Determinación de Plaguicidas Organoclorados) Sus propiedades fisicosicoquímicas los hace muy resistentes a la degradación biológica. La contaminación del agua por estos se da al ser arrastrados por el agua de los campos de cultivo hasta los ríos y mares donde se introducen en las . Sin embargo cuando ocurre una movilización súbita de la grasa. mg/L = W * 1 000 / S W son los mg/100 mL de SAL en la muestra calculada a partir de la ecuación de la recta de la curva de calibración. Normalmente es necesario aplicar el potencial en forma de impulsos para lograr una respuesta lineal del detector. Al tener especies orgánicas en el gas. puede detectar todos los compuestos. La muestra se toma únicamente en la superficie del cuerpo receptor que se vá a analizar. En caso de muestras de aguas profundas se debe utilizar para el muestreo frascos Winkler. peróxidos.cadenas alimenticias provocando la muerte de varios organismos. y y . El cromatógrafo de gases más común para los pesticidas que contiene átomos de cloro es el detector de Captura De Electrones (ECD). por lo tanto los métodos consisten en métodos de cromatografía de gases CG según la extracción liquido-liquido de las muestras de agua. disminuyendo por tanto la intensidad de la corriente. además estos métodos resultan de utilidad para determinar la presencia de los bifenilos policlorados. y es sensible a la presencia de moléculas con grupos electronegativos como halógenos. éstas capturarán parte de los electrones. Los pesticidas órganoclorados se encuentran presentes por lo general en aguas afectadas por evacuaciones agrícolas. Conservar las muestras durante el transporte a 277 K (4 0C). La Cromatografía de fase líquida de alta resolución con detección ultra violeta-visible (HPLCDAD) también es aplicable. en general. Un ECD posee b 5 milicurios de emisor . capaz de conseguir los límites de detección más bajos ( g/L e incluso ng/L). Muestreo y preservación de muestras: Muestrear con un recipiente de vidrio de un dm³ con tapón con contratapa de teflón. La cromatografía de gases es la técnica más ampliamente empleada para el análisis multiresidual de plaguicidas. así como agentes tóxicos y carcinógenos. quinonas y grupos nitro. y los métodos de cromatografía de gases/ espectrometría de masas CG/EM. Conservar las muestras en refrigeración a la misma temperatura. Dicho electrón ioniza el gas portador y se produce una ráfaga de electrones. Este detector es muy selectivo. Varios de los pesticidas son bioacumulativos y relativamente estables. siendo. etc. A.20 0C) hasta la terminación de la preparación de las muestras y en ese momento llevarlo al mismo volumen de la muestrade concentración conocida de plaguicidas organoclorados. 4 REACTIVOS Hexano (C6H14) Benceno (C6H6) CH3) Cloruro (CH2Cl2) Endrin. DDD ó TDE. 2005.CO . Así mismo preparar un estandar de recuperación colocando en un tubo de centrífuga graduado de 15 cm³ la misma cantidad de solución de plaguicidas organoclorados que se usa en la preparación de la muestra de concentración conocida.Para el control del método de extracción y purificación se efectúa en iguales condiciones y simultáneamente tres muestras: un blanco. Pp. un duplicado y una muestra de concentración conocida de plaguicidas organoclorados. Puebla. Contaminantes antropogénicos en las descargas de aguas residuales de Izúcar de Matamoros y Atlixco.333 K(30ºC-60ºC) Cloroformo (CH3Cl) Acetona (CH3 . Revista Internacional de Contaminación Ambiental. 4 Eter de petróleo punto de ebullición 303 K . E.Iso-octano (C8H18) de metileno Dieldrin.:721-728 . Guardar este tubo en el congelador a 253 K (. Dicloro difenil etano (DDE). Keltano o dicofol Navarro F. Se transfiere nuevamente el agua de la probeta al embudo de separación. dejar reposar hasta que se separen las fases. repetir desde el inciso 10. Drenar la fase acuosa a la probeta empleada para medir la muestra. Procedimiento: Extracción: Se mide en una probeta un dm³ de la muestra y transferirla a un embudo de separación de 2 dm³. Guardar este tubo en el congelador a 20ºC. un duplicado y una muestra de concentración conocida de plaguicidas organoclorados. Pasar la fase orgánica a través de una columna que contenga una capa de 5 cm de altura de sulfato de sodio pretratado recibir la fase orgánica en un matraz de fondo redondo de 500 cm³.2 con porciones de 50 cm³ de hexano dos veces y colectar los extractos de hexano en el matraz de 500 cm³. Se concentran lentamente los extractos obtenidos de 1 a 2 cm³ con ayuda de vacío en un evaporador rotatorio.Epóxido de heptacloro Lindano ( Toxafeno Heptano (C7H16) Agua grado plaguicida Tolueno (C6H5CH3) . Se agregar 100 cm³ de hexano y agitar vigorosamente al embudo durante 3 min.HCH) Hepatocloro Metoxicloro Lindano ( .HCH) Sulfato de sodio granular y anhídro (Na2SO4) grado analítico Florisil para cromatografía en columna malla 60/100 Plaguicidas organoclorados (98% al 100% de pureza). Así mismo preparar se dé estándar de recuperación colocando en un tubo de centrífuga graduado de 15 cm³ la misma cantidad de solución de plaguicidas organoclorados que se usa en la preparación de la muestra de concentración conocida. Si se forma una emulsión añadir 5 cm³ de una solución saturada de sulfato de sodio. Se toman 3 muestras: un blanco. hasta la terminación de la preparación de las muestras y en ese momento llevarlo al mismo volumen de la muestra de concentración conocida de plaguicidas organoclorados. . Siguiendo el mismo procedimiento agregar 15 g de florisil desactivado al 3% y en la parte superior añadir nuevamente 2. simultáneamente se confirma la identidad de cada plaguicida.5 cm de altura de sulfato de sodio pretratado. Concentrar lentamente el eluato hasta aproximadamente 1 cm³ con ayuda de vacío en un evaporador rotatorio. Enseguida del último lavado eluir el extracto que se encuentra en la columna con 200 cm³ de una mezcla benceno-hexano (1:1). La cuantificación se hace relacionando las alturas de los picos de las muestras con las alturas de los picos de las soluciones patrón utilizando la siguiente fórmula: . como se menciona anterirormente.3. a un tubo de centrífuga graduado de 15 cm³ hasta completar un volumen de 10 cm³. Cuantificación: La cuantificación se efectúa usando cualquiera de las dos columnas cromatográficas. el estándar de recuperación y la muestra de concentración conocida de plaguicidas organoclorados. Enjuagar el primer recipiente con 2 cm³ de hexano y transferir al segundo recipiente. inyectar en forma alternada las muestras problema y los patrones individuales de los plaguicidas cuando menos en dos columnas cromatográficas de empaque con polaridad diferente para identificar con seguridad los compuestos organoclorados que tienen cada una de las muestras. Transferir concentrado anterior cuantitativamente. Repetir esta operación por tres veces más. enseguida. añadir 2 cm de altura desulfato de sodio pretratado golpeando ligeramente la columna para tener una superficie uniforme. Dejar escurrir el disolvente por la pared de la columna para que no se altere la superficie del sulfato de sodio y recoger el eluato en un matraz balón de 500 cm³ con boca esmerilada el 24/40. Cualificación: Se inyecta primero el blanco. Con una pipeta Pasteur transferir cuantitativamente el concentrado a la columna preparada en 10. Esperar a que el disolvente baje a 1 mm de la superficie de la capa superior del sulfato entre cada enjuague (nunca permitir que la columna se seque). Así.Purificación En una columna cromatográfica se coloca un tapón de lana de vidrio en el fondo y enjuagar con acetona y hexano.1 de la siguiente manera: Pasar el contenido de un recipiente a otro usando una pipeta Pasteur. Dioxinas. en cm³ Vm = Volumen inicial de la muestra. PCBs. en cm. Basado en la separación de los distintos congéneres por cromatografía de gases y detección por espectrometría de masas (GC/MS). OPS. Para el análisis de las muestras con menor contenido en ³dioxinas´ se usan espectrómetros de masas de alta resolución (GM-HRMS) que permiten alcanzar 5 CEPIS. 1995.5 DIOXINAS. Bifenilos Policlorados (PCBs) son un grupo de 209 congéneres los cuales pueden ser divididos en dos grupos de acuerdo a sus propiedades toxicológicas: 12 congéneres exhiben propiedades toxicológicas similares a las dioxinas y es por eso que son a menudo llamados PCBs con efecto Dioxina.Las Dioxinas cubren un grupo de 75 policloro dibenzo dioxinas (PCDD) dm³ dm³ Vim= Volumen inyectado de la muestra. OMS. cromatografía de líquidos antes de la Cromatografía de Gases/Espectometría de Masa de Alta Resolución. Ae = Altura del pico del patrón. en cm Vie = Volumen inyectado del patrón. en g/ cm³ X = Volumen de dilución de la muestra extraída. los análisis involucrarán identificación y cuantificación de las dioxinas y furanos más tóxicos y el cálculo del I-TEQ (Equivalente Tóxico Internacional) para poder comparar los límites prescritos y los níveles típicos de fondo. en Ce = Concentración del patrón. Pesticidas Organoclorados . FURANOS. en congéneres y 135 policloro dibenzofuranos ( PCDF ) congéneres de los cuales 17 son de preocupación toxicológica.Donde: Am = Altura del pico de la muestra. en cm³ ATm = Atenuación del amplificador en la muestra ATe = Atenuación del amplificador en el patrón 106 = Constante para transformar de g/ cm³ a mg/ dm³. Los análisis de dioxinas utilizan extracción por disolvente. Los parámetros masivos espectrométricos permiten la separación entre los PCDDs y los PCDFs. puede hacerse por cromatografía de permeación en gel (GPC). por lo que se requiere un tratamiento previo de la muestra.8 de los no tóxicos. entre los diferentes grados de cloración y entre los congéneres etiquetados C13 y los naturales C12. Dicho proceso puede llevarse a cabo mediante cromatografía de permeación en gel (GPC).Son determinados por técnicas cromatográficas. W.3. Durante fases diferentes del denominado proceso analítico. de los plaguicidas presentes en el agua y su posterior separación y purificación por cromatografía en columna. procedimiento que puede llevarse a cabo mediante microextracción en fase sólida. Green.concentraciones de 5pg/g de grasa. extracción sólido-líquido. 7. Soxhlet. con detector de masas (GC-MS) o HPLC. El primer paso consiste en un procedimiento de extracción a partir de la muestra de la parte lipófila. puede llevarse a cabo mediante microextracción en fase sólida. d. disco de fase sólida o microondas. Rerry. 8 para controlar el proceso y corregir pérdidas potenciales durante los diferentes pasos de preparación de muestras y análisis instrumentales. Los PCBs se determinan principalmente por técnicas cromatográficas. Mac Graw Hill. España 2003 "Manual del ingeniero químico". El proceso de análisis propiamente dicho se lleva a cabo mediante un cromatógrafo de gases con detector de captura electrónica (GC-ECD). 3. 7ma edicion. disco de fase sólida o microondas. - Se realiza un proceso de clean-up para eliminar los interferentes.6 PCBs. se sustituyen cloros congéneres PCDD/F C13-2. Edit. Soxhlet. Florisil o ácido sulfúrico concentrado.líquido usando un detector de captura de electrones. El método consiste en la extracción por partición con un solo disolvente orgánico. - Procedimiento de extracción a partir de la muestra de la parte lipófila. por lo que se requiere un tratamiento previo de la muestra. Finalmente su cualificación y cuantificación se hace por cromatografía gas .7.Pp. extracción sólido-líquido. H.:101-102 6 . El proceso cromatográfico separa los 17 cloros congéneres tóxicos 2. Posteriormente se requiere un proceso de clean-up para eliminar los interferentes. R. pero debido a su baja concentración (del orden de ng/g en la mayoría de matrices) se requiere un procedimiento lento y costoso de tratamiento previo de la muestra. También se usa separación en columnas Carbopack C/Celite. etc. El paso de fraccionamiento se puede efectuar aprovechando la coplanaridad de la molécula. además de la necesidad de usar instrumental relativamente caro como pueden ser los cromatógrafos de gases y líquidos. El paso de fraccionamiento se puede efectuar aprovechando la coplanaridad de la molécula. alúmina. utilizando baldes limpios. donde se retienen selectivamente los PCBs coplanares en la estructura en capas del carbón grafitizado y luego pueden ser eluidos selectivamente con disolventes de tipo aromático. como es el caso del fraccionamiento mediante columna de carbón grafitizado poroso (tratado en este informe). También se usa separación en columnas Carbopack C/Celite.http://www. alúmina. o columna pyrenyl-silica. como pueden ser técnicas biológicas como bioensayos e inmunoensayos. embudos. alimentos. S/A. hace que tambien se encuentren PCBs en los sedimentos de fondo un poco después de que han ingresado al cuerpo de agua.). sedimentos. alambres o postes sumergidos. como es el caso del fraccionamiento mediante columna de carbón grafitizado poroso (tratado en este informe). Este hecho.7 Dioxinas y PCBs con efecto Dioxina. Todo ello ha llevado a la necesidad de buscar métodos más simples de análisis. Florisil. o columna pyrenyl-silica. Sus efectos perjudiciales y su alta difusión ambiental han hecho aumentar mucho el interés en su determinación en muchos tipos de muestras (tejidos. ademas de otras caracteristicas de los PCBs. Florisil. Es posible que los métodos de muestreo sean sencillos. donde se retienen selectivamente los PCBs coplanares en la estructura en capas del carbón grafitizado y luego pueden ser eluidos selectivamente con disolventes de tipo aromático.com/MSS-SpanishPages/Dioxinas-y-PCBs-con-efecto-Dioxina/ 7 .En la toma de muestras de agua superficial: se debe tener en cuenta que los liquidos de Askarel son mas pesados que el agua y que los aceites minerales son mas livianos que el agua.marchwood-scientific. botellas. El método más utilizado para la detección de surfactantes en el agua es por medio del método de SAAM. CONCLUSIONES: El extractor Soxhlet es un tipo de material de vidrio utilizado para la extracción de compuestos. en combinación con técnicas de disolución de isótopos.4. y permite eliminar la toxicidad de las aguas - - - Los plaguicidas organoclorados (OC) se encuentran ampliamente distribuidos en el ambiente terrestre y acuático.líquido usando un detector de captura de electrones. cromatografía de líquidos antes de la Cromatografía de Gases/Espectometría de Masa de Alta Resolución. como resultado de que en las últimas dos décadas han sido utilizados constantemente para combatir plagas en la industria. generalmente de naturaleza lipídica. los análisis involucrarán identificación y cuantificación de las dioxinas y furanos más tóxicos y el cálculo del I-TEQ (Equivalente Tóxico Internacional) para poder comparar los límites prescritos y los níveles típicos de fondo - La determinación de PCDDs y PCDFs se lleva a cabo mediante Cromatografía de Gases Capilares de Alta Resolución junto con Espectrometrías de Masa de Alta Resolución. e incluso durante las campañas de salud donde son aplicados para contrarrestar enfermedades como la malaria. a través de un solvente afin. contenidos en un sólido. Finalmente su cualificación y cuantificación se hace por cromatografía gas . . este método permite la degradación bacteriana. ya que la mayoría de jabones y detergentes son de naturaleza aniónica. de los plaguicidas presentes en el agua y su posterior separación y purificación por cromatografía en columna. la agricultura. - Para determinar su presencia se utiliza el método de Cromatografía De Gases el cual consiste en la extracción por partición con un solo disolvente orgánico. - Los análisis de dioxinas utilizan extracción por disolvente. d. H.org/master/analisis/ protopdf/GRASAS. Colombia 2000 ³Calidad del agua´ 2da edición. ³Quimica Ambiental´ 2da Edicion. 2001. A. Mac Graw Hill. España 2003 "Manual del ingeniero químico" timo iv. BIBLIOGRAFIA: Baird C.mx/leyesynormas/Norm as%20Mexicanas%20vigentes/NMX-AA-039-SCFI-2001. Contaminantes antropogénicos en las descargas de aguas residuales de Izúcar de Matamoros y Atlixco. 2006. DETERMINACIÓN DE ACEITES Y GRASAS EN AGUA. 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