CONTROLE DOS MICRORGANISMOPELA AÇÃO DOS AGENTES FÍSICOS E QUÍMICOS Os seguintes termos são usados para descrever os processos físicos e os agentes químicos destinados ao controle dos microrganismos: DESINFETANTE é um agente que mata as formas vegetativas, mas não, necessariamente as formas esporuladas dos microrganismos patogênicos. Desinfecção é o processo de destruição dos agentes infecciosos, pode usar substância química, radiação ultra-violeta, água fervente ou vapor para tratar objetos inanimados. ANTISSÉPTICO semelhante ao desinfetante, previne o crescimento ou ação de microrganismos, pela destruição dos mesmos ou pela inibição de seu crescimento ou atividade. Usualmente está associado com substâncias aplicadas aos seres vivos, pessoas ou animais. . de acordo com as exigências de saúde pública.SANEANTE é um agente que reduz a população microbiana até níveis consideráveis. viricida e fungicida indicam o tipo de microrganismo destruído.GERMICIDA é o agente que mata os microrganismos. MICROBIÁSTICO apenas inibi o crescimento dos microrganismos bacteriostático) (fungistático ou . são chamados de microbicida. Bactericida. ESTERILIZAÇÃO é o processo pelo qual os microrganismos são mortos. inativados irreversivelmente ou retirados de um material ou suspensão. inclusive as formas . esporuladas. AGENTES FÍSICOS . Os métodos físicos mais frequentes são: Temperatura Radiação ultravioleta Radiação ionizantes Filtração . Pode ser calor: seco ou úmido. .Temperatura O calor é o método mais eficiente para matar microrganismos. • oxidação • Tem baixa capacidade de penetração. . • A flambagem é a mais usual. • Menos eficiente que o calor úmido. • • Emprega-se para vidraria.Calor Seco: Age promovendo uma componentes do protoplasma. de Às temperaturas necessárias para a esterilização são 160-180°C por uma ou duas horas. óleos ou pós. Bico de Bunsen . A condição mais usada para esterilização é vapor de água aquecido à 120°C. • A pasteurização consiste no aquecimento a 60°C por 30 minutos.Calor Úmido: Age promovendo a desnaturação de proteínas e dissolução dos lipídeos. • . • • É mais eficiente que o calor seco. sob pressão de 1 atmosfera durante 15-20 minutos (autoclave). seguido de resfriamento brusco (não é esterilização). vidrarias. . meios de cultura.ESTERILIZAÇÃO EM AUTOCLAVES Usada para esterilização de reatores pequenos (30 L). etc. •Deixar o vapor fluir pela válvula de descarga. •Após expulsão do ar fechar a válvula de descarga. deixa a válvula de descarga aberta. •Atingida a condição de esterilização. manter estável pelo tempo necessária. .Modo de operação: •Completar o nível de água •Colocar o material na autoclave e fechar. expulsando o ar contido na autoclave. a pressão e temperatura devem subir até a ideal para esterilização (121°C e 1 atm). como sondas de pH e de oxigênio dissolvido.Para o resfriamento. Pequenos objetos são esterilizados de 15 a 30 minutos. já que o centro demora para atingir a temperatura adequada. Reatores necessitam de mais tempo (40 minutos a 1 hora). Só abrir a autoclave após a temperatura está próxima da temperatura ambiente. desligar o aquecimento ou fechamento da entrada de vapor. . A despressurização brusca pode provocar danos aos sensores. a temperatura de geladeira (4°C) pode ser empregada para conservação de culturas. O congelamento lento promove a formação de cristais de gelo. que perfuram a membrana e a parede celular. . Com algumas exceções. O congelamento brusco a temperaturas inferiores a -30°C seguido de dessecamento à vácuo – liofilização – é usada na conservação de microrganismos.De modo geral. os microrganismos são mais resistentes ao frio do que ao calor. Podem ser: Ionizante – comprimento de onda menor que 1 nm Não Ionizante (UV) – de 1 a 350 nm .Radiações Possuem atividade letal sobre os microrganismos. • São usadas na desinfecção de ambientes e materiais cirúrgicos.Ultravioleta A luz UV danifica o DNA das células expostas. causar queimaduras e câncer de pele. Pode lesar os olhos humanos. Inibem a replicação correta do DNA durante a reprodução celular. • . • • A radiação não é muito penetrante. • Os comprimentos de onda mais eficazes estão entre 240-280 nm. • São muito mais penetrantes que as radiações UV. raios X. • .Radiações Ionizantes Os raios gama. ou feixes de elétrons de alta energia. • Usado para esterilizar produtos farmacêuticos e suprimentos médicos. que reagem com os componentes celulares. formando radicais reativos. • Ionizam a água. • . como meios de cultura. • É utilizada na esterilização de materiais sensíveis ao calor. • É comum a utilização na entrada de ar para os biorreatores. vacinas e soluções antibióticos.Filtração A passagem de soluções ou gases através de filtros de poros suficientemente pequenos é usado para reter bactérias e fungos (não vírus). enzimas. lã de vidro e membrana poliméricas .• Baixo custo • É confiável • Mais utilizadas nas instalações industriais para esterilização do ar • Podem ser de carvão. papel. algodão. Filtros de Membrana • Apresentam poros de dimensões menores do que os microrganismos a serem retirados (0.45 μm). .20. AGENTES QUÍMICOS . centrífugas. Usados na desinfecção de pisos e superfícies. bombas. .O uso de agentes químicos tem se tornado um método bastante conveniente e efetivo de esterilização e desinfecção. Exemplo: filtros. válvulas. Também são utilizados quando equipamentos de operações unitárias ou componentes de uma instalação industrial não admite esterilização pelo vapor de água saturado. pH. Nenhum desinfetante isolado é apropriado para todas as circunstâncias. . presença de proteínas e o tempo de contato. a maioria tem ação desinfetante. presença de sais.Poucos obtém a esterilidade. A ação depende de fatores como: temperatura. . Tipo de Microrganismo Bactéria esporulante Micobactéria e Vírus pequenos ou não lipídicos Fungos Nível de atividade requerida Alto Alto ou intermediário Intermediário a baixo Dependendo do nível deBaixo atividade Bactéria vegetativa necessária Vírus médiosé ouque são escolhidos os agentes lipídicosquímicos.Ordem de resistência à exposição aos agentes químicos. Avaliação de um Desinfetante • Método de Disco-difusão . ou mecanismo de ação (agentes oxidantes. ou as funções químicas (alcoois. agentes de superfície etc). metais pesados etc). aldeídos). ou elementos químicos (halogênios. .Os agentes químicos são apresentados em grupos que tenham em comum. •Apresentação celular e mais frequente: álcool etílico e álcool isopropílico entre 60 e 90%. •Ação: ruptura da membrana desnaturação das proteínas. .ÁLCOOL •Aplicação: desinfetante de nível intermediário. •Compatibilidade com materiais: mais indicado para superfícies externas dos materiais e superfícies de vidro. havendo necessidade de submersão de objetos para uma ação mais ampla. •Características da ação: como evapora rapidamente sua ação é limitada. . na concentração de 8% em solução alcoólica e 10% em solução aquosa.FORMALDEÍDO (4 a 8%) Aplicação: desinfetante de alto nível. fungicida. mas carcinogênico. Usado na desinfecção de equipamentos. . •Pode ser encontrado na forma sólida (pastilhas formalina) ou como solução aquosa 37-40% (diluído em álcool ou água). • Espectro viruscida. • • de ação: bactericida. A solução deve ser usada por 30 minutos. DNA e síntese protéica.5-8.5) por 30 minutos. .GLUTARALDEÍDO •Aplicação usado e indicação: desinfetante de alto nível na esterilização de equipamentos dependendo do tempo de exposição. •Tempo:É alcalino utilizado em solução a 2% com pH (7. •Ação germicida: alteração do RNA. O bifenol. devido à e odor O cresol. é usado em sabonetes antibacterianos. é o compostos fenólicos mais utilizado como desinfetante de superfícies.Fenol e Compostos Fenólicos Fenol – raramente usado possibilidade de irritação desagradável. . O-fenilfenol. triclosano. 4-5% sendo que o tempo de exposição deve ser menor ou igual a 10 minutos. • Espectro de ação: bactericida. viruscida. • Usado na desinfecção de áreas de laboratório e produção. • Ação: destruição do protoplasma com ruptura da parede celular com precipitação protéica.FENÓLICOS (5%) Aplicação: desinfetante de nível baixo a intermediário. fungicida. • . Sua concentração para uso é de 0. . usado principalmente na desinfecção da pele e no tratamento das feridas. O cloro.Halogênios O iodo e o cloro são agentes antimicrobiano eficazes. O iodo está disponível como tintura de iodo. é amplamente usado. como gás ou em combinação com outras substâncias químicas. . Mais usualmente utilizada em concentração de 1000 ppm. podendo ser utilizado como desinfetante de baixo a alto nível. •Espectro de ação: Atua a concentrações tão baixas como 25 ppm para microrganismos mais sensíveis.HIPOCLORITO DE SÓDIO •Aplicação: quanto maior a concentração e/ou o tempo maior o espectro de ação. •É considerado como prejudicial ao ambiente. principalmente de metais e tecidos de algodão e sintéticos. •Compatibilidade com materiais: é bastante corrosivo. Apresenta ação rápida e baixo custo. .•Características: é o desinfetante mais amplamente utilizado. .PERÓXIDO DE HIDROGÊNIO (6 a 10%) • Aplicação: desinfetante de alto nível. •Ação: agente oxidante. ruptura da permeabilidade da membrana celular. •Tempo: a inativação de microrganismos é dependente de tempo. principalmente para materiais termo sensíveis. • Quando a concentração estiver abaixo de 6% deve ser desprezada. Desnaturação protéica. •Compatibilidade com materiais: corrói zinco cobre e latão. temperatura e concentração. COMPOSTOS QUATERNÁRIOS DE AMÔNIA •Aplicação: desinfetante de baixo nível. mas poluente ambiental. . •Ação: desnaturação das proteínas celulares essenciais e ruptura da membrana celular. resíduos aniônicos e proteínas. Muito utilizado como desinfetante de superfícies. limpeza geral. Algumas formulações são inativadas por água dura. • •Baixo nível de toxicidade direta. Inativados por tensoativos. Soluções e sua toxidade relativa ao ambiente Baixa Oxidantes Álcool Ácidos orgânicos Aldeídos Alta Compostos de quaternário de amônia Fenólicos Hipoclorito de sódio Biguanidas . a regulamentação e recomendações do uso de um germicida particular é realizada por organismos como INCQS (Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde) e ANVISA. .No Brasil. de acordo com seu registro nos órgãos governamentais competentes. As formulações existentes no mercado devem ser usadas segundo a orientação do fabricante. Etapas de um ciclo de desinfecção/esterilização química de um equipamento: Desmontagem do equipamento. de . Lavagem dos componentes com água com baixo teor de dureza para remoção dos detergentes utilizados. Limpeza dos componentes. biomassa e produtos. Montagem do equipamento e introdução da solução aquosa do germicida. Drenagem da solução germicida do sistema. Remoção dos resíduos do germicida através circulação cuidadosa de água ou outro fluido estéril. removendo os resíduos de meios de cultura. proporcionando o tempo de exposição preestabelecido para ação do germicida. fazendo uso de detergentes. . “Livre de sujeira. detergentes ou quaisquer contaminantes que possam afetar ou adulterar o produto ou processo”. resíduos.CPI – Clean in place Clean-in-place significa “Limpeza interna de uma peça ou equipamento sem relocação ou desmontagem”. 2% -2. .0%): A solução é circulada através do equipamento a ser limpos o tempo necessário para o procedimento. •Circulação de alcalinos (NaOH 0. Depois a solução é drenada.Usando um software o processo de limpeza é realizado nas seguintes fases: •Lavagem inicial: água potável é distribuída através da instalação e enviado para o dreno através de uma bomba centrífuga. . •Desinfecção: A água entra no sistema. enquanto o agente de desinfecção é adicionada através de uma bomba de dosagem. Esta etapa é muito importante. Após a limpeza ácida.•Circulação de ácido (HNO3 0. •Lavagem final: A água passa pelo sistema durante o tempo estabelecido. é essencial que todos os resíduos de ácido sejam eliminados da linha de produção. a solução é drenada.5% ou H2PO4 2%) : A solução é distribuída através do equipamento a ser limpo pelo tempo programada.