ESCUELA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE BIOQUIMICA CLINICA Verónica Briceño, Cristian Ogoño, Lenin Chuquimarca, Xavier Celi * UTPL, Bioquimica Clinica , Paralelo “B”, Loja-Ecuador. TEMA: suero . Determinación de Glucosa , Colesterol y Trigliceridos en INTRODUCCIÓN El colesterol es una sustancia que se encuentra en todos los tejidos animales, de forma especial en la bilis, en los cálculos biliares, en las grasas y, normalmente, en la sangre. El organismo necesita colesterol, pues a partir de él sintetiza hormonas y sales biliares que desempeñan un papel muy importante en la absorción de las grasas procedentes de los alimentos. Mediante un mecanismo metabólico muy preciso, el organismo mantiene en equilibrio las cantidades de colesterol que hay en la sangre y en el hígado, pero cuando el aporte de colesterol es superior al necesario durante un tiempo prolongado, el mecanismo puede sufrir alteraciones. Los triglicéridos son un tipo de grasa y el cuerpo produce algunos de ellos. Los triglicéridos también provienen del alimento que una persona come. Se puede hacer un examen de sangre, llamado nivel de triglicéridos, para medir la cantidad de éstos en la sangre. Cuando uno come, el cuerpo usa las calorías para obtener energía inmediata. Este examen con frecuencia se hace para determinar el riesgo de desarrollar cardiopatía. Un nivel alto de triglicéridos puede llevar a ateroesclerosis, lo cual incrementa el riesgo de ataque cardíaco y accidente cerebrovascular. La glucosa es un azúcar que es utilizado por los tejidos como forma de energía al combinarlo con el oxígeno de la respiración. Cuando comemos el azúcar en la sangre se eleva, lo que se consume desaparece de la sangre, para ello hay una hormona reguladora que es la insulina producida por el páncreas (islotes pancreáticos). Cuando la glucosa en sangre está muy baja, en condiciones normales por el ayuno, se secreta otra hormona llamada glucagón que hace lo contrario y mantiene los niveles de glucosa en sangre. El análisis de la glucosa sobre todo se realiza para estudiar la posible presencia de una diabetes mellitus o sacarina. Como es una enfermedad muy compleja y con grandes repercusiones de salud es un análisis muy discriminativo y útil que se realiza de forma bastante rutinaria. MATERIALES Y METODOS COLESTEROL liquicolor El colesterol se determina después de la hidrólisis enzimática y la oxidación. El indicador es la quinoneimina formada por el peróxido de hidrñogeno y 4aminoantipirina en presencia de fenol y peroxidasa. Principio de la reacción El LCF aclara totalmente la turbidez causada por las muestras lipémicas. Hg 546 nm Paso de luz 1 cm Temperatura 20. Ensayo Longitud de onda 500 nm.7 mmol/l GLUCOSE liquicolor Método . Con factor 2.9%) y repetir la determinación. Con estándar Características de la prueba Linearidad: Es lineal hasta concentraciones de colesterol de 750 mg/dl o 19.3 mmol/1.25ºC o 37ºC medición Frente a un blanco de reactivo. Muestra Se tomó un suero. Multiplicar el resultado por 3. Esquema de pipeteo Cálculo 1. Diluir las muestras con concentraciones más altas de colesterol 1+2 con solución salina fisiológica (NaCl 0. Solo se requiere un blanco de reactivo por serie..Preparación de reactivos El RGT y STD están listos para ser usados. Nota: Las muestras lipémicas usualmente producen turbidez cuando se mezcla la muestra con el reactivo generando resultados elevados falsos. pero además se puede usar plasma con heparina o EDTA.7 mmol/l Elevado: sobre 260mg/dl o 6. Interpretación clínica Sospechoso: sobre 220 mg/dl o 5. Esta prueba evita estos resultados erróneos por medio del factor aclarante de lípidos (LCF). El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la catálisis de peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona formando un complejo rojo-violeta usando la quinoneimina como indicador. Principio de la reacción .2 mmol/l TRIGLYCERIDES liquicolor Método Los triglicéridos son determinados después de hidrólisis enzimática con lipasas. En nuestro caso usamos suero. La glucosa es estable por 24 horas de 2 a 8ºC. plasma (en ayunas): 75-115 mg/dl o 4. El indicador es Quinoneimina formada a partir de peróxido de hidrógeno. Si la concentración de glucosa en la muestra es superior a estos límites diluir la muestra 1+2 con agua destilada y repetir la determinación. Principio de la reacción Los reactivos RGT y STD vienen listos para su uso.2 mmol/l. Multiplicar el resultado por 3. Muestras Plasma.La glucosa se determina después de la oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa.2-6. si el suero o plasma es separado dentro de 30 minutos después de la toma de la muestra de sangre. Valores normales Suero. 4-aminoantipirina y 4-chlorofenol bajo la influencia catalítica de peroxidasa. Esquema de pipeteo Calculo de la concentración de la glucosa Características de la prueba Linearidad: Es lineal hasta una concentración de glucosa de 400 mg/dl o 22. suero. Preparación de los reactivos El RGT y STD están listos para usar. Muestras con concentración superior deben ser diluidas 1+4 con solución salina (0. Interpretación clínica para riesgo ateroesclerótico Sospechoso: sobre 150 mg/dl o 1. Hg 546 nm Paso de luz 1 cm Temperatura 20. plasma heparinizado o plasma EDTA. Multiplique los resultados por 5. Muestra Suero.9%) y repetirse.25ºC o 37ºC Medición Frente a un blanco de reactivo (Br). Solo se requiere un blanco de reactivo por serie. ya que elimina la turbidez. Esquema de pipeteo Características de la ejecución Linearidad: es lineal hasta concentraciones de triglicéridos de 1000 mg/dl 0 11.28 mmol/l .72 mmol/l Elevado: sobre 200 mg/dl 0 2. Estabilidad: 3 días entre 2-8ºC 4 meses a -20ºC Esta prueba evita problemas con muestras lipémicas.4 mmol/l. Ensayo Longitud de onda 500 nm.. cuando se tienen valores de triglicéridos altos. y de la muestra fue de 66.8 mg/dl según la bibliografria (2) se presume que es una hipoglucemia ya que los valores inferiores a 70 mg/dl son sinonimo de deficiecia en la produccion de glucosa. pero según la bibiografia (1) dice que los valores inferiores a 200 son recomendables. en conclusion este valor pasa como normal.3 mg/dl 66.3 mg/dl. 8 mg/dl de sangre que mide la cantidad total de sustancias grasas (colesterol y triglicéridos) presente en la sangre. previo a esto se ralizo la lectura del estandar en el cual el resultado obtenido fue el esperado de 200 mg/dl que esta preestablecido por la marca comercial.8 mg/dl.3 mg/dl. Los resultados obtenidos para la glucosa en el el estandar fue de 100 mg/dl el cual fue satisfactorio al verificar que era igual preestablecido.5 m/dL por lo que se cree que se puede estar produciendo un desequilibrio en metabolismo que se puede presentar por una baja ingesta de carbohidratos . Del resultado de glucosa que es de 66. algunos factores pueden influir en el resultado como el tener guardado mucho tiempo el suero y no estar guardado e las condiciones aceptables.2 mg/dl. y ademas que al momento de realizar la practica no se realizo un buen pipeteo de los reactivosa lo cual pudo afcetar considerablemente los resultados. la lectura del serodo fue de 365 mg/dl. glucosa y triglicéridos permiten el análisis COLESTEROL TRIGLICERIDOS GLUCOSA ESTANDAR 200 mg/dl 200 mg/dl 100 mg /dl SERODO 365 mg/dl 52. CONCLUSIONES ξ Las pruebas de colesterol . y para la muestra de 51. este valor esta demasiado bajo el cual lo atribuimos a que la muestra estuvo demasiado tiempo guardado y no estuvo en las condiciones idelaes. del serodo fue de 63.3 mg/dl. ξ En las muestras analizadas el colesterol esta en 100 mg/dL .1 mg/dl 63.3 mg/dl MUESTRA 100. De los cuales para el colesterol obtuvimos un resultado de 100. Del resultado de los trigliceridos que fue de 51.8 mg/dL y los triglicéridos en 51. la glucosa en 66. se ξ . y los resultados estan dados en la Tabla 1. A la muestra se le realizo los examenes de Colesterol. Los resultados obtenidos para los trigliceridos en el estandar fue de 200 mg/dl el cual fue el esperado por estar ya preestablecido.2 mg/dl 51.1 mg/dl. DISCUSIÓN: Con el resultado obtenido para el colesterol que fue de 100.2 mg/dl se puede dar un pronostico de que esta bajo.RESULTADOS Y DISCUSIÓN TABLA 1. Trigliceridos y Glucosa. Los altos niveles de triglicéridos afectan a la salud aumentando el riesgo aterogénico y por ende el riesgo de padecer enfermedades cardiovasculares. para el serodo fue de 52. dentro de parámetros normales.com/temas/glucosa_en_sangre.com/Nutricion/colesterol. RECOMENDACIONES ξ Es importante tener presente el control periódico de sangre para mantener la concentración de triglicéridos en sangre.htm http://www.html http://www.tuotromedico.nlm. ξ Se debe atemperar los reactivos una hora antes de hacer la prueba paraqué no se alteren los resultados BIBLIOGRAFIA http://www.com/temas/glucosa_en_sangre. ξ Se debe hacer examen de control cada 5 años.tuotromedico.geosalud.indica una dieta baja en azúcares simples.grupoprevenir.htm .htm http://www. rica en hidratos de carbono complejos y baja en grasas saturadas y trans.nih.es/analisis_clinicos/colesterol_en_suero.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000403.htm http://www.